Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Fosfo-PDGFR alfa-Y754 para WB, ELISA - P16234

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PDGFR alfa

• O recetor alfa do fator de crescimento derivado das plaquetas (PDGFRA, também designado PDGFR2, CD140A) é um membro da família de recetores de tirosina cinase de tipo III, caracterizado por cinco domínios extracelulares semelhantes à imunoglobulina e um domínio intracelular de tirosina cinase dividido.
• Funciona como um recetor de superfície celular para fatores de crescimento derivados das plaquetas (PDGFA, PDGFB, PDGFC), desempenhando um papel central no desenvolvimento embrionário ao regular a proliferação celular, sobrevivência, migração e quimiotaxia.
• A sinalização do PDGFRA é essencial para a formação normal do esqueleto, fechamento cefálico e o desenvolvimento da mucosa gastrointestinal e vilosidades intestinais, bem como no recrutamento de células mesenquimais durante a organogénese.
• A ligação do ligante desencadeia a dimerização do recetor e a autofosforilação em múltiplos resíduos de tirosina (incluindo Y754), levando à ativação de vias descendentes, como as cascatas de sinalização PI3K-AKT, MAPK/ERK e STAT.
• A ativação da PLCG1 pelo PDGFRA resulta na produção de diacilglicerol e inositol 1,4,5-trisfosfato, levando à mobilização de Ca2+ citosólico e ativação da proteína cinase C.
• A nível subcelular, o PDGFRA encontra-se predominantemente na membrana celular, mas também é detetado no aparelho de Golgi e nos cílios primários, refletindo a sua localização dinâmica e tráfego.
• Para além dos seus papéis no desenvolvimento, o PDGFRA participa na ativação das plaquetas, secreção de agonistas e agregação plaquetar induzida por trombina, destacando a sua importância na hemostase e cicatrização de feridas.
• O PDGFRA é amplamente expresso em tecidos, incluindo cérebro, fibroblastos, músculo liso, coração e embriões, e está regulado positivamente em vários cancros, tornando-o um alvo de interesse na investigação oncológica.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio é um péptido fosforilado sintético em torno de Y754; verifique a especificidade da fosforilação comparando os sinais antes e depois do tratamento com fosfatase ou usando um péptido não fosforilado como controlo de bloqueio.
• Para Western blot, o peso molecular esperado é de ~123 kDa, mas a glicosilação e outras modificações podem causar ligeiros desvios. Valide o anticorpo em condições redutoras e não redutoras nos lisados celulares relevantes.
• Em ELISA, otimize as condições de revestimento e as etapas de deteção para quantificar o PDGFRA fosforilado em extratos celulares ou tecidulares. Inclua controlos positivos e negativos para garantir a especificidade do ensaio.
• A reatividade cruzada está listada como humana; se trabalhar com outras espécies, verifique a homologia da sequência em torno de Y754 para prever a potencial reatividade cruzada e realize validação experimental.

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