Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Fosfo-PI3 Cinase p55-gama (PIK3R3) para WB, IF/ICC, ELISA - Q92569

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Subunidade Reguladora Gama da PI3 Cinase (PIK3R3)

• Codificada pelo gene PIK3R3, a subunidade reguladora gama da PI3 cinase (também conhecida como p55PIK ou p55-gama) é uma subunidade reguladora de 55 kDa das fosfoinositídeo 3-quinases de classe IA, caracterizada pelo seu domínio SH2.
• Liga-se a proteínas tirosina quinases ativadas (fosforiladas) através do seu domínio SH2, modulando a sua atividade quinase; durante a estimulação com insulina, também se associa à IRS-1 para propagar sinais a jusante.
• Pertence à família de subunidades reguladoras da PI3K que inclui as isoformas p85 e p55, contribuindo para a diversidade dos complexos de sinalização da PI3K.
• Exibe a maior expressão no cérebro e nos testículos, com níveis mais baixos no tecido adiposo, rim, coração, pulmão e músculo esquelético, sugerindo papéis reguladores específicos do tecido.
• Classificada como uma fosfoproteína sujeita a splicing alternativo, e foi identificada em estudos de proteómica de alto rendimento, destacando a sua regulação pós-traducional e inclusão em conjuntos de dados de referência.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um fosfopeptídeo sintético correspondente a Y199, pelo que o anticorpo reconhece especificamente a forma fosforilada; inclua inibidores de fosfatases durante a preparação da amostra para preservar o sinal de fosforilação.
• Para Western blotting, valide a banda detetada em ~55 kDa usando lisados celulares estimulados com insulina ou tratados com pervanadato para confirmar a especificidade fosfo.
• Em IF/ICC, otimize as condições de permeabilização e fixação (por exemplo, 4% PFA seguido de metanol) para reter o epítopo de fosforilação; corar simultaneamente com um anticorpo total de PI3K p55 para avaliar a dinâmica de ativação.
• Dado que a reatividade cruzada com camundongo é relatada, o anticorpo pode ser considerado para modelos de camundongo; no entanto, verifique o desempenho no tecido ou tipo celular relevante primeiro.

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