Anticorpo policlonal de coelho Anti-Fosfo-PI3K p85α/p55γ/p85β (Y467/Y199/Y464) para WB, ELISA - P27986 / O00459 / Q92569

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Subunidade Reguladora da PI3K p85α (PIK3R1)

• Codificada pelo gene PIK3R1, a subunidade reguladora alfa da fosfatidilinositol 3-cinase (p85α) é uma proteína adaptadora chave que contém domínios SH2 e SH3, mediando o recrutamento da subunidade catalítica p110 para receptores tirosina quinase ativados na membrana plasmática.
• Através dos seus domínios SH2, a p85α se liga a resíduos de tirosina fosforilados em receptores de fatores de crescimento ativados (ex.: FGFR, PDGFR, KIT) e substratos do receptor de insulina, acoplando assim a p110 à sinalização PI3K/AKT a jusante. Referências relacionadas: PMID:7518429 PMID:17626883 PMID:19805105
• A p85α é essencial para a captação de glicose estimulada pela insulina e a síntese de glicogênio em tecidos sensíveis à insulina, ligando a atividade da PI3K à homeostase metabólica.
• A proteína modula a resposta celular ao estresse do retículo endoplasmático promovendo a translocação nuclear de XBP1, contribuindo assim para a melhoria da tolerância à glicose em condições de sobrecarga metabólica. Referências relacionadas: PMID:20348923
• O splicing alternativo gera múltiplas isoformas da p85α (ex.: p55α, p50α), com a isoforma 2 expressa predominantemente no músculo esquelético e cérebro, e em níveis mais baixos no rim e músculo cardíaco.
• Subcelularmente, a p85α se localiza no citoplasma, onde existe como monômero ou dímero, e transloca rapidamente para complexos de sinalização ligados à membrana após a estimulação por fatores de crescimento.
• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação em múltiplos resíduos de tirosina (ex.: Y467), acetilação e ubiquitinação, que regulam a estabilidade da proteína, os parceiros de interação e a terminação do sinal.
• A proteína também está implicada em interações hospedeiro-vírus e é categorizada sob palavras-chave como domínio SH2, domínio SH3, fosfoproteína e resposta ao estresse, refletindo seus papéis versáteis na regulação celular.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um fosfopeptídeo sintético correspondente aos resíduos ao redor de Y467 da p85α humana; o anticorpo tem reatividade cruzada com sítios de fosforilação equivalentes na p55γ (Y199) e na p85β (Y464). Considere verificar a especificidade por ensaios de competição com peptídeos ou tratamento com fosfatase.
• Para Western blotting, use lisados de células totais preparados com inibidores de fosfatase para preservar os fosfoepítopos. Bandas esperadas: p85α/p85β em torno de 81‑84 kDa e p55γ em torno de 42‑54 kDa. Inclua controles de carga adequados e marcadores de peso molecular.
• O anticorpo foi validado para ELISA; para análises quantitativas, considere o pareamento com um anticorpo anti-PI3K total para normalizar os níveis de fosforilação.
• Para confirmar a reatividade com proteínas endógenas, teste em linhagens celulares humanas, de camundongo ou de rato bem caracterizadas (ex.: amostras estimuladas por insulina ou fatores de crescimento) e consulte a literatura para a dinâmica esperada da fosforilação.

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