Anticorpo Policlonal Anti-Fosfo-PKA C-alfa (PRKACA)-S339 para WB, IP, ELISA - P17612

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PKA C-alfa (PRKACA)

• A PKA C-alfa (PRKACA) é a subunidade catalítica da proteína quinase dependente de cAMP, com a isoforma 1 ubíqua e a isoforma 2 específica do esperma, sendo esta última enriquecida em espermatócitos paquítenos.
• Fosforila uma vasta gama de substratos no citoplasma e núcleo, incluindo a histona H1.4, NFKB1, CDC25B, ABL1, VASP e fatores de transcrição GLI, controlando assim processos como regulação transcricional, progressão do ciclo celular e agregação plaquetária. Referências relacionadas: PMID:15642694 PMID:15905176 PMID:16387847 PMID:15178447
• A PRKACA atua como um inibidor crítico da via de sinalização hedgehog ao fosforilar GLI1/2/3 e OFD1, o que promove o processamento e impede a ativação transcricional dos genes alvo. Referências relacionadas: PMID:16705181 PMID:33934390 PMID:36202993 PMID:39138140
• Regula negativamente a sinalização mTORC1 através da fosforilação de RPTOR e também modula a sinalização de cálcio via fosforilação de RYR2. Referências relacionadas: PMID:31112131 PMID:17693412
• Na fisiologia reprodutiva, a isoforma 2 fosforila ABL1 no flagelo do espermatozoide para promover a capacitação, enquanto em oócitos, a PRKACA impede a retomada meiose inativando CDC25B.
• Subcelularmente, localiza-se no citoplasma, núcleo, membrana celular, mitocôndrias, cílios, flagelo e vesículas secretoras, refletindo seus papéis pleiotrópicos na compartimentalização da sinalização.
• Mutações patogênicas na PRKACA estão associadas à síndrome de Cushing, e a quinase está implicada no câncer através da regulação de junções de união e efeitos anti-invasivos.
• A proteína contém domínios de ligação de cAMP e ATP, um sitio de miristoilação para ancoragem na membrana e múltiplos sitios de fosforilação que regulam sua atividade e interações.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O anticorpo visa a S339 fosforilada da PRKACA. Para confirmar a especificidade pela forma fosforilada, considere usar lisados celulares tratados com fosfatase ou bloqueio competitivo com o antígeno peptídico não fosforilado.
• Para Western blotting, espera-se uma banda em aproximadamente 41 kDa em amostras humanas. Recomenda-se a otimização das condições de bloqueio e da diluição do anticorpo para reduzir o ruído de fundo.
• Em imunoprecipitação (IP) e ELISA, valide o desempenho do anticorpo em sua matriz de amostra específica e considere a reatividade cruzada com outras isoformas de PKA se usar espécies não humanas.

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