Anti-Fosfo-PKC (pan) (gama)-T514 pAb de coelho para WB e ELISA - P17252 / P05771 / Q05655 / Q02156 / P05129 / P24723 / Q04759

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PKC (pan) (gama)-T514

• Os membros da família da proteína quinase C (PKC) são serina/treonina quinases ativadas por cálcio, diacilglicerol (DAG) e fosfolipídios, regulando diversos processos celulares, incluindo proliferação, apoptose, diferenciação e migração.
• A PKC alfa (PRKCA), uma isoforma amplamente expressa e representativa, está envolvida na regulação positiva e negativa do ciclo celular e pode promover o crescimento celular via sinalização RAF1/ERK ou induzir parada de crescimento através de inibidores de CDK.
• Exibe funções antiapoptóticas ao fosforilar BCL2 e suprimir a ativação de IGFBP3 mediada por p53/TP53, e é altamente expressa em muitos cânceres, onde pode atuar como um promotor tumoral.
• Sofre translocação dependente de estímulo entre citoplasma, membrana celular, membrana mitocondrial e núcleo, permitindo sinalização específica do contexto.
• Na função cardíaca, a PKC alfa regula a hipertrofia dos cardiomiócitos, a contratilidade miocárdica e a progressão da insuficiência cardíaca; fosforila a troponina T cardíaca (TNNT2) para modular a sensibilidade ao cálcio.
• Na angiogênese, é necessária para a migração de células endoteliais, adesão à vitronectina e sinalização induzida por VEGFA, estabilizando o mRNA de VEGFA pós-transcricionalmente.
• Este anticorpo reconhece especificamente proteínas PKC fosforiladas no resíduo de treonina conservada 514 (T514 na PKC alfa; sítios equivalentes do loop de ativação nas isoformas beta, delta, epsilon, gama, eta e teta), o que é crítico para a atividade completa da quinase.
• Fosforila KLHL3 em Ser-52 em resposta à sinalização da angiotensina II, diminuindo a interação entre KLHL3 e WNK4. Referências relacionadas: PMID:25313067
• Fosforila DOCK8, levando à sua dissociação de LRCH1 e subsequente ativação da GTPase CDC42 durante a migração de células T induzida por quimiocina. Referências relacionadas: PMID:28028151
• Fosforila LRRK1, que por sua vez fosforila proteínas RAB envolvidas no tráfego intracelular. Referências relacionadas: PMID:36040231

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo fosforilado sintético em torno do T514 da PKC alfa humana; este design visa o epítopo específico de fosforilação em várias isoformas de PKC.
• Para o Western blot, inclua inibidores de fosfatases nos tampões de lise e lavagem para preservar a fosforilação, e considere o uso de soluções de bloqueio à base de BSA para reduzir a ligação inespecífica.
• A detecção por ELISA pode ser realizada em lisados celulares ou de tecidos; otimize as condições de revestimento e detecção para fosfoproteínas e valide a especificidade usando controles de peptídeo não fosforilado.
• Como o anticorpo reconhece várias isoformas de PKC, as respostas específicas da isoforma devem ser verificadas usando linhagens celulares com knockout relevantes ou inibidores seletivos de isoformas.
• As bandas previstas podem variar de 59 a 83 kDa, dependendo da isoforma; confirme o peso molecular no sistema de amostra de interesse.

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