Anticorpo Policloal Rabbit Anti-Fosfo-PPP1CA (T320) para WB, IHC-P, ELISA - P62136

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PPP1CA

• Identidade Proteica e Formação de Holoenzimas: Subunidade catalítica da proteína fosfatase de serina/treonina PP1-alfa que se associa a mais de 200 proteínas regulatórias para formar holoenzimas específicas de substrato, desfosforilando centenas de alvos biológicos (PubMed:28216226, 30158517, 35768504).
  Referências relacionadas: PMID:28216226, PMID:30158517, PMID:35768504

• Funções Celulares Principais: Essencial para a divisão celular, elongação da transcrição, metabolismo do glicogênio, contratilidade muscular e síntese proteica (PubMed:35768504, 35830882, 35831509). Também regula condutâncias iônicas, plasticidade sináptica de longo prazo e a desfosforilação de CaMKII pós-sináptica.
  Referências relacionadas: PMID:35768504, PMID:35830882, PMID:35831509

• Regulação da Transcrição via Complexo PNUTS-PP1: Componente catalítico do complexo PNUTS-PP1 que medeia a liberação da pausa e a terminação da RNA polimerase II ao desfosforilar fatores como AFF4, CDK9, SUPT5H (PubMed:39603239, 39603240, 31677974). Também promove a degradação da RNAPII após estresse de replicação e regula a estrutura da cromatina durante a transição mitose-interfase (PubMed:33264625, 20516061).
  Referências relacionadas: PMID:39603239, PMID:39603240, PMID:31677974, PMID:33264625, PMID:20516061

• Localização Subcelular: Encontrada no citoplasma, núcleo (nucleoplasma e nucléolo) e na densidade pós-sináptica, o que é consistente com seus diversos papéis regulatórios.

• Modificações Pós-traducionais e Ligação de Metais: É uma fosfoproteína acetilada que requer manganês (Mn²⁺) como cofator para sua atividade hidrolásica.

• Envolvimento em Vias de Sinalização Chave: Atua como fosfatase central no complexo SHOC2-MRAS-PP1c (SMP) para desfosforilar e ativar as quinases RAF, estimulando a via MAPK (PubMed:35768504, 35830882, 35831509, 36175670). Também desfosforila FOXP3 em células Treg, CENPA, ATG16L1 e os sensores imunes inatos IFIH1/MDA5 e RIG-I (PubMed:23396208, 25556658, 26083323, 23499489).
  Referências relacionadas: PMID:35768504, PMID:35830882, PMID:35831509, PMID:36175670, PMID:23396208, PMID:25556658, PMID:26083323, PMID:23499489

• Papéis Biológicos Adicionais: Regula o ritmo circadiano ao equilibrar a atividade de CSNK1D/E e a fosforilação de PER (PubMed:21712997). Também está envolvido no desenvolvimento embrionário (fechamento do tubo neural, fechamento da fissura óptica, migração ENCC; por similaridade) e é necessário para a replicação de alfavírus.
  Referências relacionadas: PMID:21712997

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O anticorpo foi produzido contra um peptídeo fosforilado sintético ao redor de Thr320 da PPP1CA humana; a detecção específica da PPP1CA fosforilada neste local requer que a fosforilação seja mantida durante o preparo da amostra. Recomenda-se a adição de inibidores de fosfatases aos tampões de lise.
• Para Western blot, o peso molecular previsto é de aproximadamente 38 kDa; uma banda próxima a esse tamanho é esperada em amostras relevantes. Bandas inespecíficas podem aparecer dependendo do tipo de amostra e da concentração do anticorpo; recomenda-se a otimização da diluição do anticorpo primário.
• É esperada reatividade cruzada com camundongo e rato com base na conservação da sequência; no entanto, a validação na espécie e tecido alvo é recomendada antes de estudos quantitativos.
• Para IHC-P, as condições de recuperação de antígeno e a diluição do anticorpo devem ser otimizadas por tipo de tecido. Para ELISA, considere usar um controle de peptídeo não fosforilado para confirmar a especificidade.

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