Anticorpo Monoclonal Coelho Anti-Phospho-PTEN-S380/T382/T383 para WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P60484

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PTEN

• PTEN é uma fosfatase de proteína de dupla especificidade que desfosforila proteínas fosforiladas em tirosina, serina e treonina, atuando também como fosfatase lipídica com preferência por PtdIns(3,4,5)P3, antagonizando assim a via de sinalização PI3K-AKT. Referências relacionadas: PMID:9187108, PMID:9256433, PMID:9616126, PMID:16824732, PMID:26504226, PMID:9593664
• Atua como supressor tumoral ao inibir a progressão do ciclo celular e promover a apoptose através da sua atividade de fosfatase dupla; a forma monoubiquitinada nuclear possui maior potencial apoptótico. Referências relacionadas: PMID:10468583, PMID:18716620
• PTEN regula a migração e a polaridade celular: o PTEN não fosforilado coopera com MAGI2 para suprimir a ativação de AKT1, e desfosforila a quinase de adesão focal para inibir a migração celular e a proliferação mediada por integrinas. A estimulação por fatores de crescimento induz a fosforilação de PTEN, alterando sua preferência de ligação para DLC1 e promovendo a ativação de RHOA na parte posterior das células migratórias. Referências relacionadas: PMID:11707428, PMID:22279049, PMID:26166433
• No sistema nervoso, PTEN está envolvido na neurogênese adulta, controlando a integração de neurônios recém-nascidos, o desenvolvimento dendrítico e a formação de sinapses. Ele é recrutado para membranas pós-sinápticas após a ativação do receptor NMDA e é necessário para a depressão de longo prazo (LTD).
• A proteína se localiza no citoplasma, núcleo, corpos PML, espinhas dendríticas, densidade pós-sináptica, e também é secretada.
• É expresso em níveis relativamente elevados em todos os tecidos adultos, incluindo coração, cérebro, placenta, pulmão, fígado, músculo, rim e pâncreas.
• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação (é uma fosfoproteína), acetilação e ubiquitinação, que regulam sua atividade e localização subcelular.
• PTEN está implicado em doenças como o transtorno do espectro autista e o câncer; o splicing alternativo gera isoformas como a PTENbeta.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo fosforilado sintético ao redor de S380 e T383, garantindo especificidade para a forma fosforilada. Para detecção de PTEN total, considere usar um anticorpo pan-PTEN.
• Para Western blot (WB), a banda esperada é de ~47 kDa (PTEN humano); valide no lisado de células ou tecido relevante e inclua inibidores de fosfatase durante a preparação da amostra para preservar a fosforilação.
• Para imunofluorescência (IF-P) e imuno-histoquímica (IHC-P), otimize as condições de fixação e permeabilização; inclua controles apropriados, como competição peptídica ou tratamento com fosfatase, para confirmar a especificidade fosfo-específica.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção; pareie com um anticorpo não fosfo adequado para ELISA sanduíche para quantificar os níveis de phospho-PTEN.

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