Anticorpo policlonal de coelho Anti-Fosfo-PTK2B (Y402) para WB, IF/ICC, ELISA - Q14289

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Proteína-tirosino quinase 2-beta

• Proteína-tirosino quinase não receptora que regula a reorganização do citoesqueleto de actina, polarização celular, migração, adesão, espalhamento e remodelação óssea.
• Desempenha papel na resposta imune humoral, sendo necessária para níveis normais de linfócitos B marginais no baço e para a migração de linfócitos B esplênicos; também regula a polarização de macrófagos e respostas de células T.
• Promove a reabsorção óssea osteoclástica por meio da cooperação com a quinase SRC, e pode inibir a diferenciação de células osteoprogenitoras.
• Atua como componente downstream de uma ampla gama de receptores, incluindo receptores de integrina, imunes, acoplados à proteína G, de citocinas, quimiocinas e fatores de crescimento, e medeia respostas ao estresse celular.
• Após a ativação, forma complexos de sinalização com SRC e quinases da família SRC, levando à fosforilação de resíduos de tirosina adicionais que criam sítios de acoplamento para proteínas de suporte, efetores e substratos.
• Ativa múltiplas vias de sinalização downstream, incluindo PI3K/AKT1, cascatas de quinases MAP (ERK, JNK) e GTPases da família Rho (RHOA, RAC1), controlando assim diversos processos celulares.
• Contribui para a regulação da atividade do canal iônico do receptor NMDA e dos níveis intracelulares de cálcio, promovendo a fosforilação dos receptores NMDA mediada por SRC.
• É mais abundante no cérebro, particularmente na amígdala e no hipocampo; também é expresso no baço, linfócitos e em níveis mais baixos no rim. Subcelularmente, ele se localiza no citoplasma, adesões focais, lamelipódios, córtex celular e núcleo.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um fosfopepídeo sintético correspondente à tirosina 402 da PTK2B humana; a especificidade para a forma fosforilada deve ser confirmada usando tratamento com fosfatase ou controles de peptídeo bloqueador não fosforilado.
• Para Western blotting, adicione inibidores de fosfatase nos buffers de lise para preservar a fosforilação, e considere usar um anticorpo anti-PTK2B não fosforilado como controle de carregamento para verificar o sinal dependente de fosforilação.
• Em imunofluorescência/ICC, as condições de fixação e permeabilização devem ser otimizadas para o tipo celular; a co-coloração com um anticorpo anti-PTK2B pan pode ajudar a confirmar a localização fosfo-específica.
• Para aplicações em ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção; valide com peptídeos fosforilados e não fosforilados para garantir a especificidade no sistema de ensaio.
• O anticorpo tem reatividade cruzada com PTK2B de humano, camundongo e rato de acordo com dados do fornecedor; no entanto, a validação na espécie específica e no contexto experimental é recomendada antes de estudos quantitativos.

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