Anticorpo Policlonale de Coelho Anti-Fosfo-Raptor-Ser792 para WB e ELISA - Q8N122

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Fosfo-Raptor (Ser792)

• Raptor (RPTOR), também conhecido como KIAA1303 ou RAPTOR, é a proteína regulatória associada ao mTOR e um componente principal do complexo mTORC1.
• Como um sensor de nutrientes chave, o mTORC1 promove processos anabólicos (síntese de proteínas, lipídios e nucleotídeos) e inibe vias catabólicas (autofagia) por meio da fosforilação de substratos como RPS6KB1 e EIF4EBP1. Referências relacionadas: PMID:12150925 PMID:12150926 PMID:12747827
• Raptor atua como um adaptador molecular dentro do mTORC1, mediando o recrutamento lisossomal via GTPases Rag e direcionando substratos contendo o motivo TOS para o domínio quinase MTOR. Referências relacionadas: PMID:12747827 PMID:24403073 PMID:26588989
• Subcelularmente, a Raptor se localiza na membrana do lisossomo, citoplasma e grânulos citoplasmáticos, o que é consistente com o seu papel de sinalização.
• Modificações pós-traducionais incluem fosforilação, acetilação e ubiquitinação, que regulam a atividade do mTORC1; o resíduo Ser792 alvejado por este anticorpo está localizado dentro de uma região de fosfossítio regulada.
• A expressão tecidual é ampla, com níveis mais altos no músculo esquelético, mucosa nasal e hipófise, e detectável no cérebro, pulmão, rim e placenta.
• O splicing alternativo gera isoformas, e a proteína contém repetições WD que mediam interações proteicas.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para análise por Western blot, inclua inibidores de fosfatase nos tampões de lise para preservar a fosforilação de Ser792; considere tratar as células com moduladores da via mTOR (por exemplo, rapamicina, privação de aminoácidos) para avaliar a especificidade do sinal.
• Verifique a especificidade da banda por competição com o antígeno, usando o peptídeo fosforilado de imunização em comparação com uma contraparte não fosforilada no seu sistema de amostra.
• Use um gel de transferência de alta porcentagem e tempos de transferência estendidos para a proteína completa de 149 kDa, e sempre valide no tecido ou linha celular humano ou de camundongo relevante.
• Para aplicações em ELISA, otimize as condições de revestimento e use uma estratégia de detecção específica para fosfato; a reatividade cruzada com Raptor não fosforilado deve ser descartada empiricamente.

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