Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Fosfo-RB-S780 para IHC-P, ELISA - P06400

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Proteína Associada ao Retinoblastoma (RB1)

• RB1, ou proteína associada ao retinoblastoma, é um supressor tumoral que regula estritamente o ponto de verificação do ciclo celular G1/S ao se ligar e inibir os fatores de transcrição E2F (PubMed:10499802). Referências relacionadas: PMID:10499802
• A fosforilação de RB1 mediada pela cinase dependente de ciclina (CDK), incluindo na Ser780, leva à sua dissociação de E2F, desreprimindo genes essenciais para a entrada na fase S (PubMed:10499802). Referências relacionadas: PMID:10499802
• A fosforilação pela CDK3/ciclina‑C também impulsiona a transição G0‑G1 (PubMed:15084261). Referências relacionadas: PMID:15084261
• RB1 contribui para a estabilidade da heterocromatina ao recrutar histona metiltransferases (SUV39H1, KMT5B/C) e controlar a trimetilação de H4K20.
• Subcelularmente, RB1 é predominantemente nuclear, mas pode se deslocar para o citoplasma; é expresso na retina e nos queratinócitos.
• Modificações pós-traducionais como fosforilação, acetilação e metilação ajustam finamente sua atividade repressora e interações proteicas.
• Oncoproteínas virais (SV40 grande T, HPV E7, adenovírus E1A) desestabilizam os complexos RB1‑E2F, eliminando a função supressora tumoral.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um fosfopeptídeo sintético que compreende a Ser780 do RB1 humano. Para IHC‑P, considere usar recuperação de antígeno e inibidores de fosfatase para preservar a fosforilação.
• Confirme a especificidade comparando a coloração com um anticorpo RB1 não fosfo-específico ou por tratamento com fosfatase.
• O anticorpo tem reatividade cruzada com camundongo e rato; valide-o no modelo de tecido ou celular apropriado para o seu estudo.
• Para ELISA, inclua controles de peptídeo fosforilado e não fosforilado para avaliar a especificidade fosfo.
• Como RB1 é uma proteína nuclear, etapas de enriquecimento nuclear podem melhorar a sensibilidade de detecção.

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