Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Fosfo-RB-S807/811 para WB - P06400

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Proteína Associada ao Retinoblastoma (RB1)

• Proteína supressora de tumor que regula a transição G1/S: a RB1 hipofosforilada se liga e inibe os fatores de transcrição E2F, reprimindo genes de progressão do ciclo celular. A fosforilação mediada por Ciclina/CDK libera os E2Fs para ativar a entrada na fase S (PubMed:10499802). Referências relacionadas: PMID:10499802
• Também promove a transição G0-G1 através da fosforilação por CDK3/ciclina-C (PubMed:15084261). Referências relacionadas: PMID:15084261
• Envolvida diretamente na formação da heterocromatina, mantendo a estrutura da cromatina e estabilizando a metilação de histonas; recruta as histona metiltransferases SUV39H1, KMT5B e KMT5C para controlar a trimetilação de H4K20.
• Localização subcelular: Encontrada predominantemente no núcleo, mas pode se deslocar para o citoplasma.
• Expressão tecidual: Detectada na retina e em queratinócitos do prepúcio (ao nível de proteína) (PubMed:20940255). Referências relacionadas: PMID:20940255
• A RB1 é uma fosfoproteína com sítios de fosforilação regulatórios-chave, incluindo S807 e S811, que modulam sua interação com os E2Fs.
• Interações microbianas: Oncoproteínas virais (antígeno T grande do SV40, E7 do HPV, E1A do adenovírus) se ligam e inativam a RB1, perturbando sua função supressora de tumor.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético fosforilado em torno de S807/S811 da RB1 humana; espera-se que o anticorpo detecte especificamente a RB1 fosforilada nesses sítios.
• Aplicações recomendadas: WB (banda esperada ~106 kDa), IP, IF/ICC, IF-P e ELISA. Otimize as diluições do anticorpo para cada ensaio.
• Para preservar os sinais de fosforilação, inclua inibidores de fosfatase nos tampões de lise e lavagem durante o preparo da amostra.
• É indicada reatividade cruzada com camundongo; valide em seu modelo experimental se usar amostras de camundongo.
• Use controles positivos e negativos apropriados (por exemplo, lisados fosforilados vs. desfosforilados) para confirmar a especificidade.

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