Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Fosfo-RET (Tyr905) para WB & ELISA - P07949

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do RET

• RET (proto-oncogene tirosina-proteína quinase receptor Ret) é um membro da superfamília das caderinas, funcionando como um receptor tirosina quinase que requer tanto ligando como co-receptor para ativação.
  Referências relacionadas: PMID:21994944, PMID:23333276, PMID:28846097
• Desempenha papéis essenciais na proliferação celular, navegação neuronal, migração celular e diferenciação, particularmente durante o desenvolvimento do sistema nervoso entérico e do rim.
  Referências relacionadas: PMID:20064382, PMID:20616503, PMID:20702524, PMID:21994944
• A sinalização do RET é desencadeada pela ligação de ligantes da família GDNF aos co-receptores GFRα, levando à dimerização do receptor, autofosforilação e ativação das vias de sinalização a jusante MAPK e AKT.
  Referências relacionadas: PMID:21994944, PMID:23333276, PMID:24560924, PMID:28846097
• O RET também funciona como um receptor de dependência, promovendo a sobrevivência celular na presença do ligando e induzindo apoptose na sua ausência; este mecanismo é crítico nos somatotrofos pituitários e neurónios simpáticos.
  Referências relacionadas: PMID:20616503, PMID:21357690
• Subcelularmente, o RET está localizado na membrana plasmática e na membrana do endossoma, onde a sinalização pode ser sustentada ou modulada.
• Como uma fosfoproteína, a atividade quinase do RET depende da autofosforilação de resíduos de tirosina-chave, incluindo a Tyr905 no domínio da quinase, que é essencial para a ativação catalítica e transdução de sinal.
• Mutações oncogénicas e de perda de função no RET estão associadas a neoplasias endócrinas múltiplas tipos 2A/2B (MEN2A, MEN2B) e doença de Hirschsprung (HSCR1), sublinhando a sua relevância clínica em distúrbios neuroendócrinos e do desenvolvimento.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Inclua inibidores de fosfatase nos tampões de lise e minimize os ciclos de congelação-descongelação para preservar o sinal de fosforilação.
• Utilize linhas celulares estimuladas com GDNF (por exemplo, células de neuroblastoma ou carcinoma da tiróide que expressam RET) como controlo positivo para deteção em western blot.
• Para verificar a especificidade para o fosfo‑epítopo, pré‑incube o anticorpo com o péptido imunogénico fosforilado; o sinal deve ser bloqueado pelo péptido fosforilado, mas não pelo péptido não‑fosforilado correspondente.
• Devido ao grande tamanho da proteína (124 kDa), considere usar um gel SDS‑PAGE de gradiente ou de baixa percentagem e tempos de transferência prolongados para uma resolução e eficiência de transferência ótimas.

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