Anticorpo Policlonal Anti-Fosfo-SHP1-Y564 (PTPN6) para WB, ELISA - P29350

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do SHP-1 (PTPN6)

• SHP-1 (PTPN6) é uma tirosina fosfatase não receptora, também conhecida como proteína tirosina fosfatase de células hematopoiéticas (HCP), PTP-1C e SH-PTP1. A isoforma 1 é expressa em células hematopoiéticas, enquanto a isoforma 2 é encontrada em tecidos não hematopoiéticos.

• SHP-1 regula negativamente a sinalização por desfosforilar quinases de tirosina de receptor (RTKs), incluindo EGFR, PDGFR e FGFR, e por atuar em receptores contendo motivos inibitórios baseados em tirosina de imunorreceptores (ITIM), como PDCD1 e LILRB1, para inibir a ativação de células imunes. Referências relacionadas: PMID:21258366, PMID:9733788, PMID:11907092, PMID:14739280, PMID:37932456

• Modula a sinalização de receptores de citocinas (por exemplo, receptor de IL-4) e desfosforila alvos citoplasmáticos como STING1, LCK e STAT1, conectando assim as vias imunes inatas e adaptativas. Referências relacionadas: PMID:9065461, PMID:34811497, PMID:38532423

• No núcleo, SHP-1 desfosforila fatores de transcrição como NFAT5 e regula a gliconeogênese hepática por meio do recrutamento da RNA polimerase II mediado por STAT5A ao promotor PCK1. Referências relacionadas: PMID:37595871

• Subcelularmente, SHP-1 localiza-se tanto no citoplasma quanto no núcleo, consistente com seus papéis duplos na terminação do sinal e no controle transcricional.

• A proteína é regulada por fosforilação (por exemplo, em Y564) e possui domínios SH2, bem como sítios de conjugação semelhantes à ubiquitina, destacando sua complexidade pós-traducional.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um fosfopeptídeo sintético em torno de Y564; portanto, espera-se que o anticorpo reconheça especificamente a forma fosforilada da SHP-1. Inclua controles não tratados e tratados com fosfatase no western blotting para confirmar a especificidade de fosfo.
• Para WB, use condições desnaturantes padrão e considere adicionar inibidores de fosfatase ao tampão de lise para preservar a fosforilação. O peso molecular previsto é de ~68 kDa, mas a migração real pode variar.
• Valide a reatividade do anticorpo em seu sistema celular ou tecido de interesse, particularmente em fontes hematopoiéticas versus não hematopoiéticas (diferenças de expressão de isoformas).
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado para detecção de fosfo-SHP-1; o emparelhamento com um anticorpo total de SHP-1 pode permitir a normalização.
• Otimize as diluições do anticorpo e as condições de incubação, pois os requisitos diferem entre os tipos de amostras e os desenhos experimentais.

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