Anti-Fosfo-SMAD1-S463/S465+SMAD5-S463/S465+SMAD9-S465/S467 Rabbit mAb para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q15797/Q99717/O15198

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do SMAD1

• O SMAD1 (homólogo 1 de mothers against decapentaplegic, também conhecido como BSP1, JV4-1, MADH1) pertence à família de mediadores intracelulares dos fatores de transcrição SMAD.
• Após a ligação do ligante BMP, o SMAD1 é fosforilado em Ser463/465 por receptores BMP do tipo I ativados e, em seguida, forma um complexo com o SMAD4 e transloca para o núcleo. Referências relacionadas: PMID:9335504 PMID:33667543
• Uma vez no núcleo, o complexo SMAD1/SMAD4 liga-se a Elementos de Ligação ao Smad (SBEs) para regular a transcrição de genes alvo envolvidos no desenvolvimento embrionário, diferenciação celular e homeostase tecidual.
• O SMAD1 medeia a degradação do repressor SNIP1 da CREBBP/EP300 através de um complexo OAZ1/PSMB4, o que modula ainda mais a expressão gênica (Por similaridade).
• Em nível subcelular, o SMAD1 reside tanto no citoplasma quanto no núcleo, sendo a translocação nuclear dependente da fosforilação induzida por BMP.
• A expressão é ubíqua, com os níveis mais altos observados no coração e no músculo esquelético.
• Modificações pós-traducionais incluem fosforilação (ativação), acetilação e ubiquitinação; a proteína também apresenta motivos de ligação ao zinco.
• Palavras-chave do UniProt: Estrutura 3D, Acetilação, Splicing alternativo, Ligação a DNA, Ligação a metal, Fosfoproteína, Regulação de transcrição, Conjugação Ubl, Zinco.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O anticorpo foi produzido contra um peptídeo fosforilado sintético que abrange o motivo de fosforilação conservado (SSVS) no SMAD1, SMAD5 e SMAD9; considere confirmar a especificidade comparando lisados celulares tratados com BMP versus não tratados em Western blotting.
• Para Western blotting, carregue lisados tratados adequadamente e inclua inibidores de fosfatases durante o preparo; o tamanho da banda esperado é de aproximadamente 52 kDa, mas a fosforilação pode causar pequenos deslocamentos.
• Para IHC-P e IF/ICC, valide o anticorpo com tecidos/células de controle positivo e negativo onde a sinalização BMP é conhecida por estar ativa ou inativa; a coloração nuclear indica complexos SMAD ativados.
• Em ELISA, titule o anticorpo contra peptídeos fosforilados versus não fosforilados para verificar a especificidade fosfo.
• A reatividade cruzada é relatada para humano, camundongo e rato; certifique-se do alinhamento da sequência específica da espécie ao redor dos sítios de fosforilação antes de usar com outras espécies.

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