Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Fosfo-Smad2-S250 para WB, ELISA - Q15796

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Smad2

• SMAD2 (também conhecido como JV18-1, MADH2, hMAD-2) é um SMAD regulado por receptor (R-SMAD) e um transdutor de sinal intracelular chave nas vias de sinalização TGF-beta e activina.
• Após a ligação do ligante, o SMAD2 é fosforilado pelas quinases do receptor tipo 1, forma um complexo heteromérico com o SMAD4, transloca para o núcleo e se liga ao elemento TRE para regular a transcrição dos genes alvo.
• O SMAD2 regula positivamente a atividade da quinase PDPK1, promovendo sua dissociação da proteína inibitória 14-3-3 YWHAQ.
• Pode funcionar como um supressor de tumor em carcinoma colorretal. Referências relacionadas: PMID:8752209
• A proteína se localiza tanto no citoplasma quanto no núcleo.
• Especificidade tecidual: Expressa em altos níveis no músculo esquelético, células endoteliais, coração e placenta.
• Modificações pós-traducionais incluem fosforilação, acetilação e ubiquitinação; a proteína também contém domínios de ligação ao zinco e sofre splicing alternativo.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo fosforilado sintético correspondente à serina 250 do Smad2 humano; portanto, o anticorpo é específico para a forma fosforilada neste local. Verifique a especificidade usando tratamento com fosfatase ou mutantes deficientes em fosforilação.
• Para Western blot (WB), considere usar um anticorpo Smad2 total como controle de carga. Otimize as condições de bloqueio e diluição do anticorpo; o bloqueio à base de BSA pode reduzir o ruído de fundo em comparação com o leite ao sondar proteínas fosforiladas.
• Para ELISA, valide em lisatos celulares tratados com TGF-beta versus não tratados para confirmar a detecção dependente de ativação. Pares específicos para fosfo podem exigir otimização cuidadosa das condições de captura e detecção.
• A reatividade cruzada listada inclui humano e camundongo; para outras espécies, verifique a homologia da sequência no local de fosforilação e valide experimentalmente.
• Como um anticorpo monoclonal de coelho, ele oferece alta afinidade e desempenho consistente entre lotes, apoiando o desenvolvimento de ensaios robustos.

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