Anti-Fosfo-Smad3 (S423/S425) Anticorpo Monoclonal de Coelho para WB, IHC-P, ELISA - P84022

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Fosfo-Smad3 (S423/S425)

• SMAD3 (Mothers against decapentaplegic homolog 3) é uma proteína SMAD regulada por receptor (R-SMAD) que funciona como um transdutor de sinal intracelular para as vias de TGF-beta e ativina.
• Após a fosforilação em S423 e S425 pelas quinases do receptor tipo 1, o SMAD3 forma um complexo com o SMAD4 e transloca para o núcleo para se ligar ao elemento TRE, ativando a transcrição de genes alvo.
• O SMAD3 também pode formar um complexo com SMAD4, JUN e FOS nos locais AP-1/SMAD, integrando a sinalização TGF-beta com outras vias.
• Desempenha um papel regulador na cicatrização de feridas, onde parece inibir o crescimento e a migração de queratinócitos e altera a quimiotaxia de monócitos, com efeitos sensíveis a hormônios.
• O SMAD3 regula positivamente a atividade da quinase PDPK1, promovendo sua dissociação da proteína inibitória 14-3-3 YWHAQ.
• A proteína é localizada tanto no citoplasma quanto no núcleo, deslocando-se entre os compartimentos em resposta à sinalização.
• Modificações pós-traducionais incluem fosforilação, acetilação, ADP-ribosilação e ubiquitinação, sendo a fosforilação no motivo SSXS terminal C crítica para a ativação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blotting, use tampões de lise específicos para fosfo e inclua inibidores de fosfatases para manter a fosforilação S423/S425.
• Verifique a especificidade da banda tratando lisados celulares com fosfatase lambda ou competindo com um peptídeo não fosforilado.
• Ao realizar IHC-P, otimize as condições de recuperação de antígenio e considere métodos de recuperação de epítopos fosforilados.
• Para ELISA, emparelhe com um anticorpo total de SMAD3 para quantificar a proporção de proteína fosforilada em relação à total.

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