Anticorpo Policloal de Coelho Anti-Fosfo-SMO (S611/S615) para WB, ELISA - Q99835

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do SMO

• SMO (smoothened) é um receptor acoplado à proteína G e um transdutor fundamental da via de sinalização Hedgehog, essencial para o desenvolvimento embrionário e a homeostase de tecidos em adultos.
• Na ausência de ligandos Hedgehog, o SMO é inibido pelo receptor patched (PTCH1/PTCH2), que restringe o acesso do colesterol ao SMO; a ligação de Hedgehog ao patched alivia essa inibição, permitindo a translocação do SMO para o cílio primário e sua ativação pelo colesterol. Referências relacionadas: PMID:27437577 PMID:28344083 PMID:32929279
• Após a ativação, o SMO acopla-se à proteína G G(i), inibindo a adenilato ciclase e reduzindo os níveis de cAMP; isso desreprime a proteína quinase A (PKA), levando à estabilização e ativação dos fatores de transcrição GLI. Referências relacionadas: PMID:28344083 PMID:31168089
• O SMO ativo também pode inibir diretamente a PKA ao sequestrar sua subunidade catalítica PRKACA na membrana celular, impedindo a fosforilação e o processamento dos fatores de transcrição GLI. Referências relacionadas: PMID:36202993 PMID:39138140
• O SMO localiza-se principalmente na membrana celular e na membrana do cílio primário, um compartimento chave para a sinalização Hedgehog.
• O anticorpo reconhece especificamente a fosforilação nos resíduos de serina 611 e 615, modificações pós-tradução que provavelmente influenciam a conformação, atividade ou tráfego do SMO.
• Mutações no SMO estão implicadas em vários distúrbios do desenvolvimento e cânceres, destacando seu papel regulatório crítico.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo fosforilado sintético correspondente à região de Ser611/Ser615 do SMO humano; para Western blot, espera-se uma banda próxima a 86 kDa. Para confirmar a fosforo-especificidade, considere tratar as amostras com lambda fosfatase ou usar um competidor de peptídeo não fosforilado.
• Como os estados de fosforilação do SMO podem ser dinâmicos, é recomendável o uso de coquetéis de inibidores de fosfatase durante a lise; inclua também controles positivos e negativos adequados (por exemplo, células estimuladas por Hedgehog vs. células não estimuladas).
• A detecção por Western blot pode exigir otimização do bloqueio e da diluição do anticorpo; teste uma faixa de concentrações e valide em linhagens celulares ou tecidos humanos com sinalização Hedgehog ativa (por exemplo, fibroblastos tratados com SHH).
• Para ELISA, o anticorpo pode ser adequado para detectar peptídeos de SMO fosforilado ou lisados celulares; confirme a ligação com um peptídeo fosforo-específico e um controle não fosforilado para avaliar a especificidade.

CamelBio: Sua Ponte de Fornecimento Integral

A CamelBio atende fabricantes de diagnósticos e pesquisadores com um portfólio abrangente de matérias-primas para IVD, incluindo este anticorpo anti-fosfo-SMO para estudos da via Hedgehog. Além de anticorpos individuais, oferecemos pares de anticorpos validados, clones monoclonais e policlonais otimizados, reagentes auxiliares a granel e fornecimento personalizado para alvos raros. Parcerie-se com nós para simplificar sua jornada do conceito à clínica com soluções confiáveis e escaláveis de matérias-primas.