Anticorpo Policlonal Anti-Fosfo-SMO (S611/S615/S616) para WB, ELISA - Q99835

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do SMO

• O SMO é um receptor acoplado à proteína G (GPCR) que medeia a via de sinalização hedgehog, essencial para o desenvolvimento embrionário e diferenciação celular.
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• Na ausência de hedgehog, o SMO é mantido num estado inativo pelas proteínas patched (PTCH1/PTCH2) que restringem o acesso ao colesterol. A ligação do ligando hedgehog ao patched alivia esta inibição, permitindo que o SMO se transloque para a membrana do cílio primário onde o colesterol se liga e ativa o SMO. Isto desencadeia o acoplamento às proteínas G(i), inibindo a adenilciclase e reduzindo os níveis intracelulares de cAMP.
  Referências relacionadas: PMID:27437577, PMID:28344083, PMID:31168089, PMID:32929279

• Níveis reduzidos de cAMP aliviam a supressão mediada pela proteína cinase A (PKA), promovendo a libertação e translocação nuclear dos fatores de transcrição GLI (GLI1, GLI2, GLI3), que então ativam a expressão de genes alvo.
  Referências relacionadas: PMID:31168089

• O SMO ativo suprime ainda mais a atividade da PKA através da ligação direta e sequestro da sua subunidade catalítica (PRKACA) na membrana celular, impedindo assim a fosforilação e processamento proteolítico dos fatores de transcrição GLI.
  Referências relacionadas: PMID:36202993, PMID:39138140

• O SMO promove a remoção do GPR161, um inibidor constitutivo da via, dos cílios primários, facilitando ainda mais a transdução do sinal.

• O SMO reside principalmente na membrana plasmática e na membrana do cílio primário, consistente com o seu papel na transdução de sinal nestes centros críticos de sinalização.

• O SMO sofre modificações pós-traducionais incluindo fosforilação, glicosilação e lipidação, que contribuem para a sua regulação e localização na membrana.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo foi produzido contra um peptídeo fosforilado sintético que abrange os resíduos S611, S615 e S616; espera-se que reconheça especificamente a forma fosforilada do SMO humano. Para confirmação, considere realizar tratamento com fosfatase ou comparar com um anticorpo não fosfo-SMO no seu ensaio.
• As aplicações recomendadas são Western blotting (WB) e ELISA. Para WB, o peso molecular previsto é de 86 kDa; valide o anticorpo usando linhagens de células humanas ou tecidos relevantes conhecidos por expressarem SMO ativo.
• Uma vez que a fosforilação do SMO é dinâmica e aumenta após a ativação da via hedgehog, a estimulação com sonic hedgehog (SHH) ou outros agonistas pode aumentar a sensibilidade de deteção nos seus experimentos.
• A reatividade cruzada é reportada para SMO humano; se utilizar amostras de outras espécies, verifique a homologia da sequência em redor dos locais de fosforilação previamente.

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