Anticorpo Policlonial de Coelho Anti-Fosfo-SQSTM1/p62-S349 para WB, ELISA - Q13501

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de SQSTM1/p62

• SQSTM1, também conhecida como p62, funciona como um adaptador molecular para a macroautofagia seletiva (aggrephagy), ligando agregados de proteínas polipubiquitinadas e autofagossomos através de seus domínios UBA e LIR. Referências relacionadas: PMID:15340068 PMID:15953362 PMID:16286508
• Após a ligação a proteínas ubiquitinadas através do domínio UBA, SQSTM1 sofre separação de fase líquido-líquido para formar corpos de p62, que são então direcionados para degradação autofágica. Referências relacionadas: PMID:15911346 PMID:20168092 PMID:22017874
• SQSTM1 também serve como um centro de sinalização, ativando a resposta antioxidante NFE2L2/NRF2 ao sequestrar KEAP1 em corpos de inclusão, promovendo assim o acúmulo nuclear de NRF2 e a expressão de genes citoprotetores. Referências relacionadas: PMID:20452972 PMID:28380357 PMID:33393215
• Subcelularmente, SQSTM1 localiza-se em múltiplos compartimentos, incluindo autofagossomos, vesículas citoplasmáticas, corpos PML no núcleo, endossomos tardios, lisossomos e o sarcômero em células musculares.
• A proteína é uma fosfoproteína conhecida, com fosforilação em vários resíduos (incluindo Ser349) afetando sua oligomerização, reconhecimento de carga e regulação da autofagia.
• Amplamente expressa em todos os tecidos, SQSTM1 está implicada em doenças neurodegenerativas, câncer e sinalização imunológica.
• Contém vários domínios funcionais: PB1 (polimerização), dedo de zinco tipo ZZ, TB (ligação a TRAF6), LIR (região de interação com LC3) e UBA (associado à ubiquitina), permitindo diversas interações proteína-proteína.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio é um peptídeo fosforilado sintético em torno de Ser349, sugerindo que o anticorpo reconhece especificamente SQSTM1 fosforilado neste sítio. Confirme a especificidade por tratamento com fosfatase ou comparando sinais em células estimuladas vs. não estimuladas, quando apropriado.
• Para análise de Western blot, use um gel SDS-PAGE redutor e inclua inibidores de fosfatase frescos no tampão de lise para preservar a fosforilação. Uma banda em torno de 48–62 kDa pode ser observada dependendo da amostra; SQSTM1 frequentemente corre mais alto devido a modificações pós-traducionais.
• Para aplicações de ELISA, os ensaios de ELISA frequentemente exigem otimização do pH de revestimento e das diluições do anticorpo. Valide a faixa linear do anticorpo com peptídeos fosforilados e não fosforilados conhecidos como competidores.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato é relatada, tornando-o adequado para estudos em modelos de roedores; sempre verifique em seu sistema experimental específico.

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