Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Fosfo-STAT1 (S727) para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P42224

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do STAT1

• STAT1 codifica o transdutor de sinal e ativador da transcrição 1, produzindo duas isoformas principais (STAT1α/p91 e STAT1β/p84) por splicing alternativo; também conhecido como componentes do fator de transcrição ISGF-3 p91/p84.
• STAT1 é um mediador chave da sinalização por interferon (IFN): após a ligação do IFN tipo I (IFN-α/β), ele forma o complexo ISGF3 com STAT2 e IRF9 para ativar genes antivirais; em resposta ao IFN tipo II (IFN-γ), ele homodimeriza em GAF e se liga a elementos GAS. Referências relacionadas: PMID:28753426 PMID:35568036 PMID:26479788 PMID:8156998
• A fosforilação de STAT1 em Ser727 aumenta sua atividade transcricional e é crítica para respostas biológicas completas; esta modificação ocorre em resposta ao IFN tipo II e outros estímulos. Referências relacionadas: PMID:26479788
• STAT1 também transduz sinais de KITLG/SCF e receptores de fator de crescimento de fibroblastos (FGFR1-4). Referências relacionadas: PMID:15526160 PMID:19088846
• Após a endocitose de TLR4 induzida por LPS, STAT1 é fosforilado em Thr-749, levando à ativação transcricional de ARID5A e IL12B. Referências relacionadas: PMID:32209697
• STAT1 faz "shuttle" entre o citoplasma e o núcleo; localiza-se principalmente no citoplasma em condições basais e transloca para o núcleo após ativação.
• STAT1 sofre extensas modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação (Tyr, Ser, Thr), acetilação, ADP-ribosilação, metilação e ubiquitinação, que regulam sua atividade, interação e estabilidade.
• Mutações em STAT1 estão associadas a distúrbios do sistema imunológico e imunodeficiências primárias.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo é produzido contra um peptídeo fosfo sintético abrangendo Ser727 do STAT1 humano; certifique-se de que a preparação da amostra inclua inibidores de fosfatase para preservar o estado de fosforilação.
• Para Western blotting, a proteína alvo migra em torno de 87 kDa; selecione uma porcentagem de gel apropriada (por exemplo, SDS-PAGE 8–10%) para separação ideal.
• Em imuno-histoquímica e imunofluorescência, valide os padrões de coloração em tecidos ou linhagens celulares de controle positivo conhecidos e inclua controles tratados com fosfatase para confirmar a especificidade para fosfo.
• O anticorpo reage de forma cruzada com STAT1 de camundongo e rato, mas verifique a reatividade no sistema experimental específico, pois a conservação do epítopo pode variar.
• Para ELISA, emparelhe com um anticorpo de captura validado e use padrões de peptídeo fosfo sintético para quantificação; otimize cuidadosamente as condições de bloqueio e lavagem.

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