Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Fosfo-TBC1D4-T642 para WB, ELISA - O60343

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da TBC1D4 (AS160)

• A TBC1D4, também conhecida como AS160 (substrato da Akt de 160 kDa), é um membro da família de domínios TBC1 e atua como uma proteína ativadora de GTPase (GAP) para as proteínas RAB RAB2A, RAB8A, RAB10 e RAB14.
• A isoforma 2 da TBC1D4 promove a translocação induzida por insulina do transportador de glicose SLC2A4/GLUT4 para a membrana plasmática, aumentando assim a captação de glicose em tecidos responsivos, como músculo esquelético e tecido adiposo.
• O gene codifica múltiplas isoformas; a isoforma 1 é altamente expressa no músculo esquelético e coração, enquanto a isoforma 2 é amplamente expressa com forte presença na glândula adrenal, tireoide, pulmão, rim, cólon, cérebro e tecido adiposo.
• A localização subcelular é predominantemente citoplasmática, consistente com seu papel no tráfego vesicular e transdução de sinal a partir do receptor de insulina.
• A TBC1D4 é regulada por fosforilação em múltiplos sítios, incluindo a Thr642, que é mediada pela Akt/proteína quinase B a jusante da sinalização da insulina e é crítica para sua atividade GAP e translocação do GLUT4.
• Sua expressão está diminuída nas ilhotas pancreáticas de pacientes com diabetes tipo 2, ligando a disfunção da TBC1D4 ao comprometimento da homeostase da glicose; também é regulada positivamente em células T de pacientes com dermatite atópica, sugerindo papéis mais amplos na modulação imunológica.
• A proteína sofre modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação (resíduos-chave como a Thr642), acetilação e metilação, que ajustam finamente sua atividade e interações.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo fosforilado sintético correspondente à Thr642, garantindo especificidade para a forma fosforilada; sempre use inibidores de fosfatase durante o preparo da amostra para preservar o estado de fosforilação.
• Para western blotting, o peso molecular previsto é de 147 kDa; valide a especificidade da banda usando bloqueio com peptídeo não fosforilado ou lisados tratados com fosfatase.
• Em aplicações de ELISA, confirme a eficiência de revestimento e o título do anticorpo com controles de peptídeo fosforilado versus não fosforilado.
• Foi relatada reatividade cruzada com camundongo; verifique a reatividade em sua linhagem ou tecido específico de camundongo, pois os níveis de expressão podem variar.
• Considere usar este anticorpo para monitorar vias de sinalização da insulina em modelos de resistência à insulina ou diabetes tipo 2, combinando-o com anticorpos totais contra TBC1D4 para normalização.

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