Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Fosfo-TBK1/NAK-S172 para WB, IHC-P, ELISA - Q9UHD2

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do TBK1

• TBK1 é uma serina/treonina-proteína quinase codificada pelo gene TBK1, também conhecida como NAK ou T2K.
• Desempenha um papel essencial na regulação das respostas inflamatórias a agentes estranhos ao fosforilar os fatores reguladores de interferon (IRFs) IRF3 e IRF7, levando à sua dimerização e translocação nuclear para induzir genes antivirais como IFNA e IFNB (PubMed:10581243, PubMed:11839743, PubMed:12692549, PubMed:12702806, PubMed:14703513, PubMed:15367631, PubMed:25636800). Referências relacionadas: PMID:10581243, PMID:11839743, PMID:12692549, PMID:12702806, PMID:14703513, PMID:15367631, PMID:25636800
• O TBK1 também pode funcionar como um efetor de NF-kappa-B ao fosforilar NFKBIA, IKBKB ou RELA, promovendo assim a translocação nuclear de NF-kappa-B (PubMed:10783893, PubMed:15489227). Referências relacionadas: PMID:10783893, PMID:15489227
• Atua na autofagia antibacteriana ao fosforilar OPTN em Ser-177, aumentando a ligação a LC3 (PubMed:21617041). Referências relacionadas: PMID:21617041
• O TBK1 regula positivamente o mTORC1 ao fosforilar MTOR, mas também limita o mTORC1 via fosforilação de RPTOR (PubMed:29150432, PubMed:31530866). Referências relacionadas: PMID:29150432, PMID:31530866
• A localização subcelular é predominantemente citoplasmática.
• É expresso de forma ubíqua com maior expressão no testículo; também encontrado em células ganglionares, camada de fibras nervosas e microvasculatura da retina.
• Está associado a doenças incluindo esclerose lateral amiotrófica e glaucoma; a fosforilação desempenha um papel crítico na sua atividade quinásica e na sinalização.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo fosforilado sintético ao redor da Ser172 do TBK1 humano. Para validação da fosfo-especificidade, considere o tratamento das amostras com fosfatase ou a pré-incubação com peptídeo competidor não fosforilado.
• Para western blot, o peso molecular previsto é de aproximadamente 84 kDa; garanta a separação e transferência adequadas, e use um marcador de peso molecular.
• A IHC-P pode exigir protocolos de recuperação de antígeno otimizados; teste os métodos à base de citrato e EDTA, e considere o uso de condições favoráveis a antígenos fosforilados.
• Este anticorpo policlonal de coelho é validado para ELISA; realize a titração adequada para determinar a concentração de trabalho ideal.
• A reação cruzada com camundongo e rato já foi reportada, mas a conservação da sequência sugere que ele também pode reconhecer outras espécies; valide no seu sistema de modelo específico.
• Como acontece com todos os anticorpos policlonais, pode ocorrer variabilidade entre lotes; considere validar cada novo lote em um experimento piloto.

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