Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Fosfo-β-Catenina-S45 para WB, ELISA - P35222

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da β-Catenina

• A β-catenina (catenina beta-1) é um efetor chave a jusante da via de sinalização Wnt canônica. Na ausência de Wnt, ela forma um complexo de destruição com AXIN1/2, APC, CSNK1A1 e GSK3B que fosforila seus resíduos N-terminais Ser/Thr, levando à ubiquitinação por BTRC e degradação proteassomal. Na presença de ligantes Wnt, a β-catenina escapa da degradação, acumula-se no núcleo e atua como um coativador para os fatores de transcrição TCF/LEF para ativar genes alvo de Wnt.
  Referências relacionadas: PMID:17524503 PMID:18077326 PMID:18086858
• Além da sinalização Wnt, a β-catenina também funciona como um coativador transcricional para outros fatores, como NR5A2, e promove a transição epitélio-mesenquimal (TEM) ao impulsionar genes alvo de CTNNB1/TCF.
  Referências relacionadas: PMID:22187462 PMID:29910125
• Como componente do complexo de adesão E-caderina:catenina, a β-catenina media a adesão célula-célula nas junções aderentes, ligando as caderinas ao citoesqueleto de actina.
• A β-catenina está localizada em múltiplos compartimentos subcelulares, incluindo citoplasma, núcleo, junções aderentes, membrana celular, centrossomo, polo do fuso e sinapse, refletindo seus diversos papéis na sinalização, adesão e polaridade.
• Modificações pós‑traducionais regulam sua estabilidade e atividade: fosforilada em resíduos N-terminais Ser/Thr para degradação, acetilada, S-nitrosilada e ubiquitinada; também está sujeita à regulação mediada por sumoilação. Palavras-chave do UniProt incluem fosfoproteína, glicoproteína e conjugação Ubl.
• A análise de expressão tecidual mostra a β‑catenina em tipos celulares do folículo piloso (matriz basal e periférica, bainha radicular interna/externa), cólon, neurônios corticais e tecidos de câncer de mama.
  Referências relacionadas: PMID:29367600
• O gene CTNNB1 está associado a várias doenças, incluindo câncer (por rearranjos ou mutações estabilizadoras), deficiência intelectual e outros distúrbios do desenvolvimento.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo foi produzido contra um peptídeo fosforilado sintético em torno de Ser45 da β‑catenina humana; espera-se que reconheça especificamente a β‑catenina fosforilada em Ser45, mas não a proteína não modificada. Para detecção endógena, inclua inibidores de fosfatase durante o preparo da amostra.
• Com base nos dados do fornecedor, o anticorpo é adequado para aplicações de Western blot (WB) e ELISA. Para WB, valide a banda prevista em torno de 85‑kDa em lisados de controle positivo (por exemplo, células estimuladas por Wnt ou inibidas por GSK3).
• O anticorpo mostra reatividade cruzada com a β‑catenina de camundongo e rato, tornando-o útil em organismos modelo comuns. Sempre confirme a especificidade em seu sistema usando amostras tratadas com fosfatase ou peptídeos bloqueadores específicos.
• Como o estado de fosforilação da β‑catenina muda rapidamente com o tratamento celular, o tempo experimental cuidadoso e o manuseio das células são críticos; considere usar um protocolo de estabilização da β‑catenina se os níveis totais também precisarem ser comparados.
• Este produto é enviado em gelo para preservar a atividade; armazene alíquotas nas temperaturas recomendadas e evite ciclos de congelamento-descongelamento.
• Para ELISA, otimize as concentrações de revestimento e as condições de detecção usando controles padrão de peptídeo fosfo versus peptídeo não fosfo para garantir a especificidade do sítio fosfo.

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