Anticorpo Policlonal Anti-Fosfo-β-Catenina (S552) para WB, ELISA - P35222

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da β-Catenina (CTNNB1)

• Atua como um componente chave a jusante da via canônica de sinalização Wnt. Na ausência de Wnt, forma um complexo de degradação com AXIN1, APC e GSK3B que fosforila resíduos de Ser/Thr do terminal N, levando à ubiquitinação e degradação proteassomal. Após a estimulação por Wnt, se acumula no núcleo e atua como coativador para os fatores de transcrição TCF/LEF para ativar genes responsivos a Wnt. Referências relacionadas: PMID:17524503, PMID:18077326, PMID:18086858
• Também atua como coativador transcripcional para outros fatores como NR5A2, expandindo seus papéis regulatórios além da via canônica TCF/LEF. Referências relacionadas: PMID:22187462
• Promove a transição epitelial para mesenquimal (EMT) e a transição mesenquimal para epitelial (MET) ao induzir a transcrição de genes alvo de CTNNB1/TCF, ligando a sinalização Wnt a processos do desenvolvimento e cancerígenos. Referências relacionadas: PMID:29910125
• Funciona como uma molécula de adesão celular ao se ligar à E-caderina nas junções aderentes, acoplando assim a adesão mediada por caderina ao citoesqueleto de actina.
• Participa da via CDK2/PTPN6/CTNNB1/CEACAM1 que medeia a internalização da insulina. Referências relacionadas: PMID:21262353
• Bloqueia a anoique em células epiteliais malignas renais e intestinais ao diminuir a expressão de DAPK2, promovendo o crescimento independente de ancoragem. Referências relacionadas: PMID:18957423
• Interrompe a formação de corpos nucleares PML ao inibir a sumoilação de PML mediada por RANBP2. Referências relacionadas: PMID:22155184
• Amplamente distribuído na célula, encontrado no citoplasma, núcleo, junções aderentes, centrossomo, polos do fuso mitótico e membrana celular. Altamente expresso em células do folículo piloso, cólon e neurônios corticais, com níveis proteicos elevados relatados em tecidos de câncer de mama. Referências relacionadas: PMID:29367600

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo fosforilado sintético ao redor da S552 da β-Catenina humana. Ao realizar western blot (WB), verifique que a banda detectada corresponde à proteína de 85 kDa esperada e que é especificamente enriquecida sob condições que promovem a fosforilação de S552 (por exemplo, ativação da via Wnt).
• Para aplicações de ELISA, considere combinar este anticorpo de detecção com um anticorpo de captura que reconheça a β-Catenina total para medir os níveis de fosfo-S552; otimize as condições de revestimento e detecção usando controles de peptídeo fosforilado e não fosforilado.
• Dada a reatividade cruzada com humano, camundongo e rato, valide o desempenho do anticorpo na sua espécie e modelo específico de tecido/linhagem celular, pois os padrões de fosforilação e a acessibilidade do epítopo podem variar.
• Inclua inibidores de fosfatase nos tampões de lise durante a preparação da amostra para preservar o sinal de fosforilação.
• Avalie a especificidade do anticorpo comparando os sinais em lisados tratados e não tratados com fosfatase ou usando um controle de bloqueio com peptídeo não fosforilado.

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