Anticorpo Policlonal Anti-Fosfo-VASP-S239 para WB, IHC-P, ELISA - P50552

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da VASP

• VASP (Proteína fosforilada estimulada por vasodilatador) é uma proteína associada à actina pertencente à família Ena/VASP, que desempenha papéis críticos na dinâmica do citoesqueleto de actina e na polaridade celular.
• A VASP promove o alongamento dos filamentos de actina, protegendo as extremidades livres das proteínas de capeamento e aumentando as taxas de polimerização, regulando assim a dinâmica de lamellipódios e filopódios, a ativação plaquetária e a migração celular.
• Nas plaquetas, onde é altamente expressa, a VASP regula a dinâmica da actina e desempenha um papel importante na agregação plaquetária.
• A VASP localiza-se em adesões focais, junções apertadas e na membrana de lamellipódios e filopódios, funcionando em locais de remodelação dinâmica da actina.
• A VASP é uma fosfoproteína; a fosforilação em sítios regulatórios modula suas funções na montagem da actina, sendo o S239 um alvo chave para sinalização por quinases.
• A proteína contém domínios de hélice-coiled e de ligação a SH3 que mediam interações proteína-proteína essenciais para a organização do citoesqueleto e motilidade celular.
• A VASP também contribui para a motilidade baseada em actina de patógenos, como a Listeria monocytogenes, em células hospedeiras.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Como o imunógeno é um fosfopeptídeo sintético, inclua inibidores de fosfatase durante o preparo da amostra para preservar as marcas de fosforilação para detecção precisa.
• Valide a especificidade para fosfo em Western blot tratando amostras com fosfatase lambda; a perda de sinal confirma a dependência da fosforilação em S239.
• Para IHC-P, otimize as condições de recuperação de antígeno suavemente, pois calor excessivo pode danificar o grupo fosfato; considere usar um método de recuperação de baixa temperatura.
• Verifique a homologia de sequência da região do peptídeo em rato e rato para confirmar a reatividade cruzada esperada; pequenas diferenças podem afetar a afinidade de ligação.
• Sempre execute controles não fosforilados e fosforilados em paralelo para distinguir a proteína total dos sinais fosforilados.

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