Anticorpo Policlonado de Coelho Anti-Fosfo-YAP1-S127 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P46937

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da YAP1

• O regulador transcricional YAP1 (proteína associada a Yes 1, homólogo de Yorkie) é um componente central da via de sinalização Hippo, onde atua tanto como coativador quanto como corepressor para controlar o tamanho de órgãos e suprimir a tumorigênese. Referências relacionadas: PMID:17974916 PMID:18280240
• A fosforilação mediada por LATS1/2 na posição Ser127 promove a retenção citoplasmática da YAP1 ao gerar um sítio de ligação para 14-3-3, inibindo assim sua translocação nuclear e atividade transcricional. Referências relacionadas: PMID:18158288 PMID:26598551 PMID:34404733
• A YAP1 nuclear se liga aos fatores de transcrição TEAD para regular genes envolvidos na proliferação celular, crescimento independente de ancoragem e transição epitelial-mesenquimal (EMT). Referências relacionadas: PMID:18579750
• YAP1 regula a morfologia 3D do tecido e a contratilidade da actomiosina via ARHGAP18, e atua como corepressor para suprimir a ciliogênese ao reduzir a expressão de AURKA e PLK1. Referências relacionadas: PMID:25778702 PMID:25849865
• YAP1 coopera com WWTR1/TAZ para modular a sinalização TGF-β/SMAD e atua em sinergia com WBP2 para aumentar a atividade transcricional do receptor de progesterona. Referências relacionadas: PMID:16772533
• YAP1 localiza-se predominantemente no citoplasma e se transloca para o núcleo após ativação; também é encontrada nas junções apertadas e na membrana celular.
• O aumento da expressão de YAP1 está associado a câncer de fígado e de próstata, enquanto isoformas com truncamento no N-terminal são detectadas em neurônios estriados na doença de Huntington.
• YAP1 é classificada como fosfoproteína e proto-oncogene, refletindo sua regulação dependente de fosforilação e potencial oncogênico.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para detecção fosfo-específica, inclua sempre coquetéis de inibidores de fosfatase durante a lise celular e preparação das amostras para preservar o estado de fosforilação da Ser127.
• Verifique a fosfo-especificidade tratando as amostras com fosfatase lambda ou fosfatase intestinal de bezerro antes do immunoblotting.
• Para IHC-P, otimize os métodos de recuperação de antígeno (por exemplo, tampão citrato pH 6,0 ou EDTA pH 9,0) para equilibrar a exposição do fosfo-epítopo e a morfologia do tecido.
• Para IF/ICC, permeabilize as células com 0,1–0,5% de Triton X-100 e use um tampão de bloqueio compatível com a detecção de fosfo-anticorpos (por exemplo, 5% de BSA em TBST).
• Ao realizar ELISA, considere usar um peptídeo não fosforilado como controle negativo para validar a especificidade.
• Como se trata de um anticorpo policlonado de coelho, use um anticorpo secundário anti-coelho apropriado e confirme as diluições ótimas de forma empírica para cada aplicação.

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