Anticorpo Policlonar de Coelho Anti-Fosfo-ZAP70-Y319 para WB, IP, ELISA - P43403

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da ZAP70

• ZAP-70 (proteína associada à cadeia zeta de 70 kDa) é uma tirosina quinase citoplasmática codificada pelo gene ZAP70 (SRK) e pertence à família Syk de tirosina quinases não receptoras.
• Essencial para a imunidade adaptativa, a ZAP-70 é recrutada para o complexo fosforilado do receptor de células T (TCR) na membrana plasmática através dos seus domínios SH2, iniciando a sinalização a jusante. Referências relacionadas: PMID:7509083
• Após o acoplamento do TCR, a ZAP-70 fosforila os adaptadores chave LAT e LCP2, desencadeando cascatas que levam à ativação, proliferação de células T e produção de citocinas.
• Regula o desenvolvimento de timócitos, promovendo a sobrevivência e progressão do ciclo celular de timócitos duplamente negativos antes da seleção positiva.
• Também está envolvido no desenvolvimento e ativação de células B primárias através da via de sinalização do receptor de células B (BCR).
• Localizada no citoplasma e na membrana celular, a ZAP-70 sofre fosforilação na posição Y319 (entre outros resíduos) para aliviar a autoinibição e permitir a atividade quinase completa.
• Fosforilação, acetilação e ubiquitinação são modificações pós-traducionais críticas que regulam a estabilidade e a função da ZAP-70.
• Expressa predominantemente em células T, células natural killer, timócitos precoces e células pro/pré-B.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Este anticorpo é produzido contra um fosfopéptido sintético correspondente à posição Y319 da ZAP70 humana; confirme a especificidade por ensaio de competição com peptídeo, se necessário.
• Para Western blotting, use protocolos fosfo-específicos validados e inclua inibidores de fosfatase nos tampões de lise para preservar os estados de fosforilação.
• Em experimentos de imunoprecipitação, condições de lise suaves são recomendadas para manter as interações proteína-proteína e a acessibilidade do epítopo.
• Valide o desempenho em linhagens de células T humanas apropriadas (como Jurkat) ativadas via anti-CD3/CD28 para induzir a fosforilação da ZAP70.
• Para aplicações de ELISA, titule a concentração do anticorpo contra um padrão de fosfopéptido para garantir um intervalo de detecção linear.

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