Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-PI3 Kinase p110 delta para WB, IHC-P, ELISA - O00329

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PI3 Kinase p110 delta

• Codificada pelo gene PIK3CD, a PI3 Kinase p110 delta é a subunidade catalítica da isoforma delta da fosfoinositídeo-3-quinase de classe I, que fosforila o fosfatidilinositol e seus derivados na posição 3 do anel de inositol para produzir segundos mensageiros 3-fosfoinositídeos. Referências relacionadas: PMID:9235916
• Especificamente, utiliza ATP para converter PtdIns(4,5)P2 (fosfatidilinositol 4,5-bisfosfato) em PIP3 (fosfatidilinositol 3,4,5-trisfosfato), desencadeando o recrutamento de proteínas contendo domínio PH, como AKT1 e PDPK1, para a membrana plasmática e ativando cascatas de sinalização a jusante. Referências relacionadas: PMID:15135396
• A proteína é expressa predominantemente em leucócitos, com os níveis mais altos encontrados em células mononucleares de sangue periférico, baço e timo; expressão mais baixa é observada em testículos, útero, cólon e intestino delgado.
• Subcelularmente, a PI3 Kinase p110 delta localiza-se no citoplasma, onde interage com subunidades reguladoras e substratos ligados à membrana.
• Desempenha papéis essenciais na imunidade adaptativa e inata, incluindo desenvolvimento, proliferação, migração e troca de classe de anticorpos de células B; sinalização e diferenciação de receptores de células T; maturação e citotoxicidade de células natural killer (NK); e respostas alérgicas mediadas por mastócitos.
• Existem duas isoformas devido ao splicing alternativo: a isoforma 1 é expressa predominantemente em leucócitos, enquanto a isoforma 2 mostra expressão elevada em alguns tumores colorretais e ovarianos e pode estabilizar os níveis totais de RAS.
• A proteína está sujeita a fosforilação e está ligada ao distúrbio de imunodeficiência primária síndrome da PI3K delta ativada (APDS) quando mutada.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético dentro dos aminoácidos 200–300 da proteína humana; alinhe a sequência do imunógeno com sua espécie alvo para confirmar a reatividade cruzada para espécies não listadas.
• Para Western blotting (WB), antecipe uma banda em aproximadamente 119 kDa. Inclua controles positivos e negativos apropriados e valide a detecção usando um sistema de expressão conhecido (por exemplo, lisados de leucócitos).
• Em imuno-histoquímica (IHC‑P), considere condições de recuperação de antígeno adaptadas para alvos citoplasmáticos e otimize a diluição do anticorpo primário usando tecido conhecido por expressar a proteína (por exemplo, seções de baço ou timo).
• Para ensaios de ELISA, emparelhe com um anticorpo de captura/detecção adequado ou use o anticorpo como reagente de detecção; valide usando proteína recombinante ou lisados celulares.
• Como um anticorpo monoclonal de coelho, use um conjugado secundário anti-IgG de coelho para detecção em formatos indiretos.

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