Anticorpo Policlonado Anti-PI3 Kinase p85 alpha para WB, IHC-P, ELISA - P27986

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PI3 Kinase p85 alpha

• Codificada pelo gene PIK3R1, a subunidade reguladora alfa da fosfoinositide 3-quinase (p85α) é a isoforma reguladora predominante das PI3 quinases de classe IA, existindo como múltiplas variantes de splicing incluindo a isoforma 1 (canônica), isoforma 2 (cérebro/músculo esquelético) e isoforma 4.
• Funciona como uma proteína adaptadora, usando seus domínios SH2 para se ligar a resíduos de tirosina fosforilados em receptores tirosina quinases ativados (ex.: FGFR1-4, KIT, PDGFRA/B) e substratos do receptor de insulina, recrutando assim a subunidade catalítica p110 para a membrana plasmática para produção local de PIP3. Referências relacionadas: PMID:7518429 PMID:17626883 PMID:19805105
• Essencial para a captação de glicose mediada pela insulina e síntese de glicogênio; também modula a resposta ao estresse do RE promovendo a translocação nuclear da isoforma 2 de XBP1 em hepatócitos, contribuindo para a melhoria da tolerância à glicose. Referências relacionadas: PMID:20348923
• Medeia a sinalização da integrina beta-2 (ITGB2), acoplando eventos de adesão à ativação da PI3K e rearranjo do citoesqueleto.
• A proteína é predominantemente citosólica e se transloca para microdomínios de membrana após estimulação; contém um domínio SH3 N-terminal, um domínio de homologia com região de quebra de cluster de prógenitor rico em proline e dois domínios SH2 C-terminais.
• Modificações pós-traducionais incluem fosforilação em múltiplos resíduos de tirosina/serina (crítica para a atividade e interações proteicas), acetilação e ubiquitinação, que ajustam sua estabilidade e saída de sinalização.
• Clinicamente, variantes germinativas ou somáticas em PIK3R1 estão associadas à síndrome SHORT (baixa estatura, hiperextensibilidade, depressão ocular, anomalia de Rieger, atraso na dentição) e vários cânceres, destacando seu papel no crescimento e homeostase metabólica.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde a uma região (aa 240-380) dentro do domínio inter-SH2, que é conservada entre humano, camundongo e rato, consistente com a reatividade cruzada relatada.
• Para Western blotting, é esperada uma banda de aproximadamente 84 kDa; considere usar lisados de células totais de células HepG2 ou 3T3-L1 estimuladas com insulina para aumentar a detecção.
• Em IHC-P, é sugerida a recuperação de antígeno com tampão de citrato (pH 6,0); teste a diluição ótima do anticorpo em seções incluídas em parafina fixadas em formalina de carcinoma de mama ou cólon humano.
• A adequação para ELISA indica reatividade com p85α nativo ou recombinante; valide em seu formato de ensaio específico com controles positivos e negativos apropriados.

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