Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-PI3 Quinase p85 alfa/beta para WB, ELISA - P27986 / O00459

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PI3 Quinase p85 alfa/beta

• Codificadas por PIK3R1 (p85-alfa) e PIK3R2 (p85-beta), estas subunidades regulatórias da fosfatidilinositol 3-quinase funcionam como proteínas adaptadoras que ligam a subunidade catalítica p110 a receptores tirosina quinase ativados via domínios SH2.
• Liga-se a proteínas tirosina quinases ativadas através do seu domínio SH2, mediando a translocação para a membrana da unidade catalítica p110. Essencial para a captação de glicose estimulada por insulina e síntese de glicogênio em tecidos sensíveis à insulina, e participa em vias de sinalização a jusante de FGFR, KIT e PDGFR. Modula respostas ao estresse do RE promovendo a translocação nuclear de XBP1 no fígado, contribuindo para melhor tolerância à glicose. Referências relacionadas: PMID:17626883 PMID:19805105 PMID:7518429 PMID:20348923
• O splicing alternativo gera múltiplos isoformas; o isoforma 2 é predominantemente expresso em músculo esquelético e cérebro, com níveis mais baixos em rim e músculo cardíaco.
• A localização subcelular é principalmente citoplasmática, onde facilita a transdução de sinal de receptores de membrana para efetores intracelulares.
• Modificações pós-traducionais incluem acetilação, fosforilação e ubiquitinação, influenciando sua estabilidade e atividade. Palavras-chave como domínio SH2, domínio SH3, interação hospedeiro-vírus e variante de doença (nanismo) destacam seus papéis multifuncionais.
• Atua como um fator do hospedeiro em interações virais e está associado a distúrbios do desenvolvimento, como a síndrome SHORT (nanismo).

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde a um peptídeo dentro dos aminoácidos 400–500 do p85 alfa/beta humano, uma região conservada em ambos os isoformas, suportando o reconhecimento das variantes alfa e beta.
• Para Western blot (WB), valide o anticorpo em lisados de linhagens celulares humanas ou de rato conhecidas por expressar PI3K p85 (ex.: HeLa, adipócitos 3T3-L1). Bandas esperadas: ~42–54 kDa (predominantemente p85-alfa) e ~81–84 kDa (p85-beta). Bandas adicionais de isoformas de splice ou produtos de degradação podem aparecer; otimize a preparação do lisado e a carga da amostra de acordo.
• Para ELISA, considere emparelhar com um anticorpo de captura/detecção validado após testes internos. Verifique a reatividade cruzada com isoformas relacionadas e use condições de bloqueio e lavagem apropriadas para minimizar o fundo.
• Como a reatividade cruzada é listada para humano e rato, a conservação da sequência alvo deve ser verificada se estendendo para outras espécies; realize um alinhamento de sequência antes da aplicação.

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