Anticorpo Policlonal Anti-PI3K p85α/p55γ/p85β para WB, IF/ICC, ELISA - P27986 / O00459 / Q92569

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de PI3K p85α/p55γ/p85β (PIK3R1/PIK3R2/PIK3R3)

• As subunidades regulatórias da PI3K p85α (PIK3R1), p55γ (PIK3R3) e p85β (PIK3R2) são adaptadores não catalíticos que ligam a subunidade catalítica p110 a receptores tirosina quinase ativados. p85α contém dois domínios SH2 e um domínio SH3, ligando-se a resíduos de tirosina fosforilados em receptores como FGFR, KIT, PDGFR e integrina β2 (ITGB2), mediando assim o recrutamento e ativação da PI3K na membrana. Referências relacionadas: PMID:17626883 PMID:19805105 PMID:7518429
• A subunidade p85α desempenha um papel essencial na sinalização da insulina, promovendo a captação de glicose e a síntese de glicogênio em tecidos sensíveis à insulina, e modula a resposta celular ao estresse do RE ao facilitar a translocação nuclear da isoforma 2 de XBP1 durante sobrecarga metabólica no fígado. Referências relacionadas: PMID:20348923
• Essas subunidades regulatórias existem como múltiplas isoformas: PIK3R1 produz as isoformas p85α, p55α e p50α via splicing alternativo, enquanto PIK3R2 codifica p85β e PIK3R3 codifica p55γ. A isoforma 2 (p50α) de PIK3R1 é expressa predominantemente em músculo esquelético e cérebro, com níveis mais baixos em rim e músculo cardíaco.
• Subcelularmente, a proteína p85α localiza-se principalmente no citoplasma, onde interage tanto com complexos receptores quanto com a subunidade catalítica p110.
• Modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, fosforilação e ubiquitinação, regulam a estabilidade e sinalização da p85α; a proteína também é um fator de hospedeiro conhecido para interações virais (PALAVRAS-CHAVE: Acetilação, Fosfoproteína, Conjugação Ubl, Interação hospedeiro-vírus).
• Os pesos moleculares previstos refletem a diversidade de isoformas: p85α e p85β migram aproximadamente a 81–84 kDa, enquanto as isoformas mais curtas p55γ e p50α são detectadas em torno de 42–54 kDa.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno foi projetado usando uma sequência peptídica conservada dentro dos aminoácidos 400–500, compartilhada entre PIK3R1, PIK3R2 e PIK3R3, permitindo o reconhecimento de múltiplas isoformas de subunidades regulatórias e reatividade cruzada com amostras de humano, camundongo e rato.
• Para Western blotting (WB), valide a diluição do anticorpo primário em seu sistema de amostra específico; uma faixa inicial de 1:500–1:2000 é frequentemente usada para policlonais de coelho, mas a otimização é crítica para resolver as bandas esperadas em ~42–54 kDa (p55γ/p50α) e ~81–84 kDa (p85α/p85β).
• Em imunofluorescência/imunocitoquímica (IF/ICC), inclua controles apropriados (por exemplo, IgG de coelho não imunizado) e considere protocolos de permeabilização que preservem epítopos citoplasmáticos.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção; combine-o com um anticorpo adequado para a subunidade catalítica p110 para configurar formatos sanduíche para estudar a dinâmica de interação da PI3K.

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