Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-PIAS1+PIAS2 para WB, IHC-P, ELISA - O75925/O75928

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de PIAS1/PIAS2

• PIAS1 atua como uma SUMO E3 ligase e fator de ancoragem de SUMO, catalisando a SUMOilação de diversos substratos. Ele funciona como um coregulador transcricional crítico que modula as vias de sinalização de STAT, p53 e hormônios esteroides, ativando ou reprimindo a expressão gênica dependendo do contexto celular. Referências relacionadas: PMID:11583632, PMID:11867732, PMID:14500712
• PIAS1 se liga a sequências de DNA ricas em A/T in vitro e interage diretamente com regiões regulatórias gênicas, como a caixa TAAT do promotor de MYOD1, para regular a ligação de fatores de transcrição independentemente de sua atividade de SUMOilação. Referências relacionadas: PMID:15133049
• PIAS1 se localiza principalmente em speckles nucleares e corpos PML, com presença adicional no citoplasma e associação ao citoesqueleto, facilitando seus papéis tanto em processos nucleares quanto na sinalização citoplasmática.
• A expressão tecidual é ampla, com níveis particularmente elevados no testículo, sugerindo funções especializadas no desenvolvimento de células germinativas.
• PIAS1 SUMOila fatores-chave de reparo e cromatina: estabiliza MRE11 na cromatina durante a ressecção de extremidades de DNA e media a SUMOilação seletiva de parálogo de MTA1 para controlar a expressão gênica. Referências relacionadas: PMID:36050397, PMID:21965678
• Durante infecção viral, PIAS1 restringe a replicação lítica do vírus Epstein-Barr (EBV) ao inibir fatores de transcrição virais; o vírus pode escapar dessa restrição por meio da clivagem de PIAS1 mediada por caspase. Referências relacionadas: PMID:29262325
• Este anticorpo também reconhece PIAS2 (PIASx), uma E3 SUMO ligase intimamente relacionada que compartilha extensa similaridade de sequência com PIAS1 na região C-terminal e está envolvida em vias regulatórias transcricionais análogas.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético que compreende os aminoácidos 552–651 de PIAS1 humano; ao realizar o western blot, espera-se uma banda principal de aproximadamente 76 kDa tanto para PIAS1 quanto para PIAS2.
• Para WB e IHC-P, considere usar lisados de controle positivo de testículo ou linhas celulares que expressem níveis elevados de PIAS1/2, e valide o anticorpo com proteínas recombinantes ou silenciamento por siRNA/shRNA.
• A diluição ideal do anticorpo deve ser determinada empiricamente; comece com 1:500–1:2000 para WB e 1:100–1:500 para IHC-P em condições padrão.
• Devido à alta conservação da região do epítopo, este anticorpo também detecta PIAS2, mas é recomendável confirmar a especificidade em modelos de knockout ou knockdown.
• Para aplicações em ELISA, o antígeno de revestimento pode exigir otimização da captura de peptídeo ou proteína; considere usar o peptídeo imunógeno como controle positivo.

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