Anticorpo Policlonico de Coelho Anti-PICK1 para IHC-P, ELISA - Q9NRD5

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PICK1

• PICK1 (proteína de ligação PRKCA), também referida como Proteína que interage com a quinase C 1 ou PRKCABP, atua como uma proteína adaptadora que se liga e organiza a localização subcelular de várias proteínas de membrana por meio de interações com o domínio PDZ.
• Ela desempenha um papel crítico na plasticidade sináptica ao regular o tráfego e a internalização de receptores glutamatérgicos do tipo AMPA, potencialmente por meio de mecanismos dependentes de PRKCA.
• PICK1 inibe a atividade de nucleação de actina do complexo Arp2/3 de forma competitiva com os fatores promotores da nucleação, modulando assim a morfologia neuronal e a endocitose de AMPAR.
• Ela é necessária para a contração da espinha dendrítica durante a depressão de longo prazo (LTD) em sinapses excitatórias, ligando a dinâmica da actina ao enfraquecimento sináptico.
• PICK1 se localiza no citoplasma, região perinuclear, membrana, densidade pós-sináptica, sinapse, sinaptossomo, e se associa ao citoesqueleto.
• Expressa de forma ubíqua, PICK1 também regula a morfologia dos astrócitos ao antagonizar o ativador Arp2/3 WASL/N-WASP.
• Outras funções relatadas incluem a regulação dos canais iônicos sensíveis a ácidos ASIC1/ASIC3.
• A proteína contém sítios de ligação a metais (zinco, cálcio) e modificação lipídica (palmitoilação), e está sujeita a fosforilação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 300–400 da PICK1 humana (próximo ao C-terminal). O mapeamento de epítopos sugere que o anticorpo pode reconhecer um epítopo linear nesta região; considere usar o peptídeo para inibição competitiva em ELISA para confirmar a especificidade.
• Para IHC-P, recomendam-se métodos clássicos de recuperação de antígenos (induzidos por calor ou enzimáticos), e os padrões de coloração devem refletir as localizações subcelulares conhecidas, como densidades citoplasmáticas e pós-sinápticas. Valide em cérebro humano normal ou outros tecidos que expressam PICK1.
• Como anticorpo policlonico, pode ocorrer variabilidade entre lotes; é recomendável realizar experimentos piloto e incluir controles positivos e negativos.
• Embora não seja originalmente validado para Western blot, se tentar realizar WB após desnaturação por calor, pode ser observada a detecção da banda alvo em ~47 kDa; a otimização do bloqueio e da concentração do anticorpo é essencial.

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