Anti-PIK3C2A Anticorpo Policlonal de Coelho para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - O00443

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PIK3C2A

• O PIK3C2A codifica a subunidade catalítica da fosfoinositídeo 3-quinase de classe II C2 alfa (PI3K-C2α), uma quinase de lipídios que gera os segundos mensageiros fosfatidilinositol 3-fosfato (PtdIns3P) e fosfatidilinositol 3,4-bisfosfato (PtdIns(3,4)P2).
• Desempenha um papel central no tráfego intracelular, incluindo a formação de vesículas endocíticas revestidas de clatrina, endocitose independente de dinamina e tráfego de componentes ciliares.
• Media a sinalização da insulina e a homeostase da glicose: requerido para a translocação de GLUT4 para a membrana plasmática e captação de glicose, e participa na secreção de insulina induzida por glicose via ativação de AKT1 e exocitose de grânulos de insulina.
• A localização subcelular inclui a membrana celular, vesículas revestidas de clatrina, citoplasma, núcleo, aparelho de Golgi e rede trans-Golgi, refletindo suas funções dinâmicas de tráfego.
• Envolvido na regulação da ciliogênese e tráfego de componentes ciliares. Referências relacionadas: PMID:31034465
• Expresso em uma variedade de tecidos, com os níveis mais altos no coração, placenta e ovário; também detectado em células endoteliais, músculo liso e ilhotas pancreáticas, com expressão reduzida em ilhotas diabéticas tipo 2.
• Modificações pós-traducionais incluem acetilação e fosforilação; palavras-chave também destacam associações com doenças (catarata, nanismo), embora os detalhes mecanísticos sejam limitados.
• O splicing alternativo gera múltiplas isoformas, potencialmente com papéis funcionais distintos.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região N-terminal (aa 1–200) do PIK3C2A humano; pode detectar todas as isoformas conhecidas, mas é aconselhada a verificação com controles específicos de isoforma.
• O peso molecular previsto é de ~191 kDa; para western blotting, use um gel SDS-PAGE de 6–8% e otimize as condições de transferência para proteínas de alto peso molecular.
• As aplicações validadas (WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA) são para amostras humanas, de camundongo e rato; cada ensaio pode requerer otimização individual das diluições do anticorpo e protocolos de detecção.
• Para imuno-histoquímica em secções de parafina, a recuperação de antígeno (induzida por calor ou enzimática) pode ser necessária; considere testar ambos os métodos.
• Em imunofluorescência, a colocalização com marcadores de organelas (por exemplo, TGN46, clatrina) pode confirmar a distribuição subcelular esperada.
• A estimulação com insulina ou tratamentos relacionados pode revelar respostas de translocação dinâmica em modelos celulares apropriados, dado o papel do PIK3C2A na sinalização da insulina.

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