Anticorpo Policlonal Anti-PIK3CA para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P42336

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PIK3CA

• O PIK3CA codifica a subunidade catalítica p110-alfa da PI3K, uma quinase lipídica que fosforila o fosfatidilinositol 4,5-bifosfato (PtdIns(4,5)P2) para gerar fosfatidilinositol 3,4,5-trifosfato (PIP3), um importante segundo mensageiro.
  Referências relacionadas: PMID:15135396, PMID:23936502, PMID:28676499
• O PIP3 recruta proteínas contendo domínio de plecstrina (PH), como AKT1 e PDPK1, para a membrana, iniciando cascatas de sinalização que promovem crescimento, proliferação, sobrevivência, motilidade celular e reorganização do citoesqueleto.
• O PIK3CA exibe atividade intrínseca de serina-proteína quinase, permitindo a autofosforilação da subunidade reguladora p85-alfa e a fosforilação de substratos como 4EBP1 e H-Ras, potencialmente modulando vias de sinalização a jusante.
  Referências relacionadas: PMID:23936502, PMID:28676499
• É ativado por receptores tirosina quinase (por exemplo, EGFR, receptor de insulina, VEGFR) e RAS, desempenhando papéis essenciais na sinalização de fatores de crescimento, angiogênese e desenvolvimento vascular.
• O PIK3CA é classificado como um proto-oncogene; mutações somáticas de ganho de função são frequentemente detectadas em uma ampla gama de cânceres humanos, impulsionando a ativação descontrolada da via PI3K/AKT.
• A proteína também está implicada na fagocitose e pinocitose, embora os mecanismos exatos permaneçam parcialmente caracterizados (Por similaridade).

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno compreende os aminoácidos 401–600 do PIK3CA humano; esta região central é bem conservada entre humano, camundongo e rato, consistente com a reatividade cruzada relatada.
• Para Western blot, o PIK3CA migra com um peso molecular previsto de ~124 kDa; garanta resolução e transferência adequadas na eletroforese em gel.
• Valide o desempenho do anticorpo em lisados de controle positivo relevantes (por exemplo, linhagens de células cancerosas superexpressando PIK3CA ou estimuladas com fatores de crescimento) antes de usar em amostras experimentais.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P), otimize protocolos de recuperação antigênica (por exemplo, recuperação de epítopo induzida por calor) e considere titular a concentração do anticorpo para obter coloração específica.
• Como o PIK3CA está envolvido em numerosas redes de sinalização, inclua inibidores de via apropriados em estudos funcionais se estiver usando o anticorpo para co-detecção ou pull-down.

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