Anticorpo Policlonico de Coelho Anti-PIKFYVE para WB, ELISA - Q9Y2I7

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PIKFYVE

• PIKFYVE, também conhecida como PIP5K3, é uma quinase de lipídios e de serina-proteína de dupla especificidade que atua como a única enzima responsável pela síntese de fosfatidilinositol 3,5-bisfosfato (PtdIns(3,5)P2) a partir de fosfatidilinositol 3-fosfato (PubMed:17556371, PubMed:41639454). Referências relacionadas: PMID:17556371 | PMID:41639454
• A proteína contém um domínio de dedo de zinco FYVE N-terminal que a direciona para membranas endossomais, onde se localiza principalmente em endossomos precoces e tardios, fagossomos e vesículas citoplasmáticas.
• PIKFYVE é um regulador crítico da homeostase da endomembrana, controlando a fissão, fusão e maturação dos endossomos; é essencial para a transição de endossomos precoces para tardios e para a função lisossomal (PubMed:30612035, PubMed:22621786). Referências relacionadas: PMID:30612035 | PMID:22621786
• Através da sua atividade de quinase lipídica, PIKFYVE regula a autofagia, a maturação do vacúolo e a recuperação de nutrientes, facilitando a reciclagem do conteúdo lisossomal de volta para a rede de endossomos (PubMed:27623384). Referências relacionadas: PMID:27623384
• A quinase também desempenha um papel na sinalização da insulina e na translocação de GLUT4, contribuindo assim para a homeostase sistêmica da glicose (Por similaridade).
• Em células imunológicas, PIKFYVE é necessária para a fusão fagossomo-lisossomo, geração de ROS e apresentação de antígenos via MHC classe II, processos vitais para a imunidade inata e adaptativa (PubMed:28779020, PubMed:30612035). Referências relacionadas: PMID:28779020 | PMID:30612035
• A autofosforilação de PIKFYVE downregula a sua atividade de quinase lipídica e estimula a lipídio fosfatase FIG4, criando uma alça regulatória que ajusta finamente os níveis de PtdIns(3,5)P2 (PubMed:33098764). Referências relacionadas: PMID:33098764
• Notavelmente, a enzima é sequestrada por coronavírus como o SARS-CoV e o SARS-CoV-2 para facilitar a entrada celular via endocitose.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Dado que o imunógeno abrange os aminoácidos 269–545 da PIKFYVE humana, espera-se que o anticorpo reconheça a proteína endógena em amostras humanas, de camundongo e de rato. Para Western blotting, observe o grande peso molecular (~237 kDa); use um gel de acrilamida de baixa porcentagem (por exemplo, 6–8%) e tempos de transferência estendidos para garantir uma transferência eficiente da proteína.
• Para ELISA, este anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção para a proteína PIKFYVE recombinante; confirme as concentrações ideais de revestimento de forma empírica.
• Considere a inclusão de controles positivos e negativos apropriados, como lisados de células com expressão conhecida de PIKFYVE, e valide o anticorpo no sistema experimental relevante.

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