Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-PIM1 para WB, IHC-P, ELISA - P11309

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PIM1

• PIM1 é uma quinase serina/treonina-proteína que atua como um proto-oncogene, promovendo a sobrevivência e proliferação celular e fornecendo uma vantagem seletiva na tumorigênese. Referências relacionadas: PMID:15528381, PMID:1825810, PMID:31548394
• Ela exerce atividade oncogênica regulando a atividade transcricional de MYC e fosforilando/inibindo as proteínas pró-apoptóticas BAD, MAP3K5 e FOXO3. Referências relacionadas: PMID:18593906
• PIM1 fosforila MAP3K5, reduzindo sua atividade quinase e inibindo a ativação da caspase-3 e apoptose mediada por JNK/p38MAPK a jusante. Referências relacionadas: PMID:19749799
• A quinase promove a progressão do ciclo celular nas transições G1-S e G2-M fosforilando CDC25A e CDC25C, e regula a estabilidade e localização de CDKN1A e CDKN1B. Referências relacionadas: PMID:16356754, PMID:12431783, PMID:18593906
• PIM1 pode influenciar a estrutura da cromatina através da fosforilação de HP1 gama/CBX3 e regula positivamente a sinalização mTORC1 fosforilando e inibindo DEPDC5. Referências relacionadas: PMID:10664448, PMID:31548394
• Ela fosforila e ativa ABCG2, contribuindo para a resistência a medicamentos, e atua como um regulador negativo da imunidade inata fosforilando GBP1. Referências relacionadas: PMID:18056989, PMID:37797010
• PIM1 localiza-se no citoplasma, núcleo e membrana celular. É predominantemente expressa em tecidos hematopoiéticos e da linhagem germinativa, com isoformas detectadas no câncer de próstata.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado é um peptídeo sintético correspondente à região N-terminal (aa 1-100) do PIM1 humano. Esta região é conservada entre humano, camundongo e rato, contribuindo para a reatividade cruzada. Verifique as homólogas de sequência para outras espécies, se necessário.
• Para Western blotting (WB), uma banda específica em aproximadamente 36 kDa é esperada. Inclua controles positivos (por exemplo, HeLa, Jurkat) e negativos apropriados para confirmar a especificidade.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P), métodos padrão de recuperação de antígeno podem ser necessários. Considere testar múltiplos tampões de recuperação e otimizar a diluição do anticorpo com base no tipo de tecido.
• No ELISA, use proteína PIM1 recombinante ou purificada como antígeno de revestimento. Realize titulações em dama para determinar as concentrações ideais de anticorpo e antígeno.
• Devido ao envolvimento da proteína em múltiplas vias de sinalização, os resultados devem ser validados usando abordagens complementares, como ensaios de superexpressão ou knockdown mediado por siRNA.

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