Anticorpo policlonal de coelho anti-PIM1 para WB e ELISA - P11309

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da PIM1

• O gene PIM1 codifica a proteína-serina/treonina-quinase pim-1, membro da família de quinases PIM. A iniciação alternativa produz duas isoformas (isoforma 1 e isoforma 2), ambas detectadas em linhagens celulares de câncer de próstata.
• Atua como um proto-oncogene ao promover a sobrevivência e a proliferação celular, conferindo uma vantagem seletiva na tumorigênese. Referências relacionadas: PMID:15528381 PMID:1825810 PMID:31548394
• Inibe a apoptose por meio da fosforilação de proteínas pró-apoptóticas: a fosforilação de BAD libera Bcl-X(L) antiapoptótica; a fosforilação de MAP3K5 reduz a atividade de JNK/p38MAPK e a ativação da caspase-3; a fosforilação de FOXO3 também contribui para a sinalização de sobrevivência. Referências relacionadas: PMID:18593906 PMID:19749799
• Regula a progressão do ciclo celular por meio da fosforilação de CDC25A e CDC25C, estimulando as transições G1-S e G2-M, estabilizando CDKN1A no citoplasma e reduzindo a expressão de CDKN1B. Referências relacionadas: PMID:16356754 PMID:12431783 PMID:18593906
• Pode influenciar a estrutura da cromatina por meio da fosforilação de HP1 gama/CBX3. Referências relacionadas: PMID:10664448
• Regula positivamente a sinalização de mTORC1 por meio da fosforilação e inibição de DEPDC5, um componente do complexo GATOR1. Referências relacionadas: PMID:31548394
• Regula negativamente a imunidade inata por meio da fosforilação de GBP1, levando à sua interação com 14-3-3 sigma e retenção citoplasmática, inativando-a na ausência de infecção. Referências relacionadas: PMID:37797010
• A localização subcelular inclui o citoplasma, o núcleo e a membrana celular.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético localizado dentro dos aminoácidos 213-313 da PIM1 humana. No Western blot, a PIM1 endógena pode aparecer como bandas em torno de 35 e 45 kDa devido às diferenças entre isoformas; considere o uso de controles positivos apropriados, como linhagens celulares hematopoiéticas ou de câncer de próstata.
• Nas aplicações de ELISA, titule tanto o anticorpo quanto o antígeno para estabelecer proporções ideais entre sinal e ruído; a reatividade cruzada com a PIM1 de camundongo e rato permite ensaios multiespécies após a validação.
• Valide a especificidade do anticorpo em seu sistema experimental usando inibidores conhecidos de PIM1 ou knockdown por siRNA para confirmar a identidade da banda.

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