Anticorpo Policlonal Anti-PINK1 (Coelho) para WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - Q9BXM7

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PINK1

• A PINK1 é uma serina/treonina-proteína quinase que atua como um sensor de danos mitocondriais, fosforilando proteínas para coordenar mecanismos de controle de qualidade mitocondrial que removem e substituem componentes disfuncionais. Referências relacionadas: PMID:40080546, PMID:14607334, PMID:15087508, PMID:18443288
• Após estresse mitocondrial irreversível, a PINK1 acumula-se na membrana mitocondrial externa, fosforila cadeias de poliubiquitina, recruta e ativa a PRKN, que ubiquitina proteínas da OMM para iniciar a mitofagia. Referências relacionadas: PMID:14607334, PMID:15087508, PMID:18443288, PMID:19966284
• A via PINK1-PRKN promove a fissão mitocondrial ao mediar a fosforilação e degradação de proteínas de fusão como a MFN2, impedindo a refusão e facilitando o engolfamento autofágico. Referências relacionadas: PMID:18443288, PMID:23620051, PMID:24898855
• A PINK1 também promove a fissão independentemente da PRKN e da mitofagia mediada por ATG7, ao fosforilar e ativar a DNM1L. Referências relacionadas: PMID:18443288, PMID:32484300
• Regula a motilidade das mitocôndrias danificadas promovendo a ubiquitinação e degradação de MIRO1 e MIRO2, provavelmente inibindo o transporte axonal anterógrado para favorecer a mitofagia no soma. Referências relacionadas: PMID:22396657
• Necessária para a redução da ubiquinona pelo complexo I mitocondrial através da fosforilação da subunidade NDUFA10 do complexo I (Por similaridade).
• Fosforila a LETM1, regulando positivamente sua atividade de transporte de cálcio mitocondrial. Referências relacionadas: PMID:29123128
• Localização subcelular: membrana mitocondrial externa, membrana mitocondrial interna, citoplasma, citosol. Altamente expressa no coração, músculo esquelético e testículos; níveis mais baixos no cérebro, placenta, fígado, rim, pâncreas, próstata, ovário e intestino delgado. Também conhecida como BRPK ou proteína quinase putativa induzida por PTEN; associada à doença de Parkinson e neurodegeneração.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Dado que o imunógeno corresponde aos aminoácidos 282–581, o anticorpo pode reconhecer a PINK1 de comprimento total (~63 kDa) e potencialmente formas processadas. Para western blotting, valide usando controles positivos apropriados, como lisados de coração ou músculo esquelético, e considere o uso de enriquecimento mitocondrial.
• Para imunofluorescência (IF/ICC), espere um padrão de coloração mitocondrial que co-localize com marcadores mitocondriais como Tom20; inclua tratamentos com indutores de mitofagia (por exemplo, CCCP) para observar o acúmulo.
• Para IHC-P, teste em tecidos conhecidos de alta expressão (coração, músculo esquelético, testículo) e realize a otimização da recuperação de antígeno. A reatividade cruzada com camundongos e ratos permite estudos em organismos modelo.
• As aplicações de ELISA podem ser adequadas para detectar PINK1 em lisados celulares ou teciduais; no entanto, recomenda-se o emparelhamento com padrões validados.

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