Anticorpo Policlonal Anti-PIP4K2B para WB, ELISA - P78356

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PIP4K2B

• A PIP4K2B (Fosfatidilinositol 5-fosfato 4-quinase tipo-2 beta) é um membro da família de quinases de lípidos PIP4K. Nomes alternativos incluem PIP5K2B, PIP5KIIbeta e PI5P4KB.
• Catalisa a fosforilação do fosfatidilinositol 5-fosfato (PI(5)P) para gerar fosfatidilinositol 4,5-bisfosfato (PtdIns(4,5)P2), um fosfoinositídeo crítico na transdução de sinais. Referências relacionadas: PMID:26774281, PMID:9038203
• A PIP4K2B exibe preferência pelo GTP em relação ao ATP na fosforilação do PI(5)P, e a sua atividade de quinase é modulada pelos níveis fisiológicos de GTP, ligando-a à deteção metabólica. Referências relacionadas: PMID:26774281
• A enzima regula negativamente a sinalização da insulina através de um mecanismo independente da catálise, interagindo com as PIP5Ks para suprimir a síntese de PtdIns(4,5)P2 e a conversão a jusante para PtdIns(3,4,5)P3. Referências relacionadas: PMID:31091439
• A nível subcelular, a PIP4K2B localiza-se na membrana do retículo endoplasmático, membrana celular, núcleo e citoplasma, indicando papéis versáteis em diferentes compartimentos.
• A expressão tecidular é elevada no cérebro, coração, pâncreas, músculo esquelético e rim, com níveis mais baixos na placenta, pulmão e fígado.
• As modificações pós-traducionais incluem acetilação, conjugação de ubiquitina e splicing alternativo, sugerindo mecanismos regulatórios complexos.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio corresponde à PIP4K2B humana de comprimento total (aa 1-270), o que pode reconhecer múltiplas isoformas; valide a especificidade no sistema de amostra relevante.
• Para o Western blot (WB), considere o uso de condições redutoras e controlos apropriados, uma vez que o peso molecular previsto é de ~47 kDa; a migração real pode variar devido a modificações.
• As aplicações de ELISA podem requerer otimização do antigénio de revestimento e da diluição do anticorpo; a reatividade cruzada com outras isoformas de PIP4K deve ser avaliada, se necessário.
• Como o anticorpo é policlonal de coelho, a consistência entre lotes deve ser verificada para ensaios quantitativos; considere o uso de anticorpos de deteção emparelhados para o desenvolvimento de ELISA sanduíche.
• Dado que a expressão da PIP4K2B varia entre os tecidos, selecione o lisado celular ou tecidular apropriado com base na especificidade tecidular relatada (por exemplo, cérebro, coração, pâncreas) para controlos positivos.

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