Anticorpo Policlonal Anti-PIWIL1 para WB, IF-P, IHC-P, ELISA - Q9JMB7

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PIWIL1

• A proteína semelhante a Piwi 1 (PIWIL1/MIWI) é uma endorribonuclease que desempenha um papel central nas células germinativas pós-natais, reprimindo elementos transponíveis, protegendo assim a integridade da linhagem germinativa. Referências relacionadas: PMID:11578866, PMID:21237665, PMID:22121019

• Como componente central da via piRNA, a PIWIL1 liga-se diretamente a piRNAs metilados com uma forte preferência por uridina na primeira posição (viés 1U), guiando a metilação e silenciamento de transposons. Referências relacionadas: PMID:24757166, PMID:11578866, PMID:21237665, PMID:22121019

• A PIWIL1 cliva mRNAs de transposons através da sua atividade endorribonucleásica, mas não está envolvida no ciclo de amplificação de piRNA (ping-pong). Referências relacionadas: PMID:22121019

• A proteína localiza-se no citoplasma e exibe expressão tecido-específica no testículo (espermatócitos) e cérebro. Nas gónadas masculinas, a expressão inicia-se cerca de duas semanas após o nascimento, coincidindo com o início da espermatogénese.

• A PIWIL1 é necessária para a formação do corpo cromatóide e contribui para a estabilidade de certos miRNAs, sugerindo funções reguladoras adicionais para além do silenciamento de transposons. Referências relacionadas: PMID:16787948

• Durante a espermatogénese tardia, a PIWIL1 sequestra a RNF8 no citoplasma; a sua própria ubiquitinação e subsequente degradação libertam a RNF8, permitindo a troca de histona por protamina. Referências relacionadas: PMID:28552346

• Características funcionais-chave incluem ligação a cofatores de iões metálicos (magnésio), splicing alternativo e modificações pós-traducionais (ubiquitinação, metilação), classificando a PIWIL1 como uma hidrolase regulatória multi-domínio.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aminoácidos 1–160 da região N-terminal) encontra-se numa região conservada entre humano, rato e rato, alinhando-se com o perfil de reatividade cruzada reportado; considere verificar a reatividade no seu sistema modelo específico.
• Para Western blot, é esperada uma banda a aproximadamente 99 kDa. Utilize um controlo positivo, como lisado de testículo de rato, e valide a banda observada com um controlo de carga apropriado.
• A deteção por imunofluorescência requer permeabilização para aceder à localização citoplasmática; uma coloração conjunta com marcadores de células germinativas (ex., DDX4) pode ajudar a confirmar a especificidade do tipo celular.
• Para imuno-histoquímica em cortes de tecido fixado em formalina e incluído em parafina, pode ser necessária recuperação antigénica; cortes de tecido testicular servem como um controlo positivo adequado.
• Aplicações de ELISA podem beneficiar do uso de um antigénio de revestimento baseado em péptido ou fragmento; faça titulação das concentrações de anticorpo para otimizar a relação sinal-ruído.

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