Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-PKA RIIα (PRKAR2A) para WB, ELISA - P13861

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PRKAR2A

• O gene PRKAR2A codifica a subunidade regulatória alfa do tipo II da proteína quinase dependente de AMPc, também conhecida como PKR2, que é um componente-chave do complexo holoenzimático da PKA.
• A proteína contém dois domínios de ligação ao AMPc e atua como a subunidade regulatória que inibe a atividade catalítica da PKA na ausência de AMPc; após a ligação do AMPc, ela se dissocia e ativa a quinase.
• As subunidades regulatórias do tipo II mediam a associação com a membrana por ligação às proteínas de ancoragem da quinase A (AKAPs), localizando assim a atividade da PKA em compartimentos subcelulares específicos e integrando a sinalização por AMPc com outras vias.
• PRKAR2A é uma das quatro isoformas de subunidade regulatória (I-alfa, I-beta, II-alfa e II-beta) cuja expressão varia entre os tecidos, sendo constitutiva ou indutível dependendo do tipo de célula.
• Subcelularmente, a PRKAR2A é encontrada no citoplasma e se associa à membrana celular, refletindo seu papel na sinalização compartimentalizada por AMPc.
• A proteína sofre modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação e acetilação, que podem modular sua atividade e interações (palavras-chave UniProt: Acetilação, Fosfoproteína).

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região C-terminal (aminoácidos 312-404) da PRKAR2A humana, que inclui parte do segundo domínio de ligação ao AMPc; considere isso ao avaliar a reatividade cruzada entre isoformas.
• Para Western blotting, detecte uma banda de aproximadamente 46 kDa em lisados de células humanas; valide o anticorpo no sistema de amostra relevante para confirmar a especificidade.
• Este anticorpo é adequado para ELISA; as diluições de trabalho ideais devem ser determinadas experimentalmente pelo usuário final.
• Como o anticorpo foi desenvolvido contra um fragmento recombinante, ele pode reconhecer epítopos lineares; para a detecção de proteína nativa, considere testar em condições que preservem as estruturas conformacionais.

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