Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-PKC alfa para WB, IHC-P, ELISA - P17252

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PKC alfa

• A proteína quinase C alfa (PKCα) é uma serina/treonina-proteína quinase dependente de cálcio, fosfolipídios e diacilglicerol (DAG) codificada pelo gene PRKCA. Ela pertence à família PKC e contém domínios de dedo de zinco característicos e um sítio de ligação a ATP.
• A PKCα desempenha um papel central na proliferação celular, diferenciação, apoptose, migração e adesão. Ela promove o crescimento celular via sinalização MAPK/ERK mediada por RAF1 e também pode induzir a parada do ciclo celular ao upregular os inibidores de CDK CDKN1A e CDKN1B.
• Apresenta atividade antiapoptótica em células cancerosas; por exemplo, ela fosforila o BCL2 para bloquear a apoptose e suprime a ativação de IGFBP3 mediada por p53/TP53 em células de glioma.
• É altamente expressa em muitos tipos de câncer e funciona como um promotor tumoral, contribuindo para os fenótipos malignos em gliomas e carcinomas de mama.
• No sistema cardiovascular, regula negativamente a contratilidade miocárdica por meio da fosforilação da troponina T cardíaca (TNNT2/CTNT) e media a hipertrofia dos cardiomiócitos via sinalização MAPK1/3 (ERK1/2).
• Está envolvida na angiogênese, agregação plaquetária e inflamação. Ela regula a migração de células endoteliais e a sinalização de VEGFA, além de modular as respostas de macrófagos induzidas por LPS.
• A localização subcelular inclui citoplasma, membrana celular, membrana mitocondrial e núcleo. Ocorre translocação dependente de estímulo, como o deslocamento para lamellipodia após ferimento ou para o núcleo durante a diferenciação de macrófagos.
• Alvos adicionais de fosforilação incluem DOCK8 (regulando a migração de células T através da ativação de CDC42), KLHL3 (modulando a interação com WNK4 em resposta à angiotensina II) e LRRK1 (controlando o tráfego de proteínas RAB). Referências relacionadas: PMID:28028151 PMID:25313067 PMID:36040231

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde a uma região C-terminal (aa 573–672) da PKC alfa humana. Esta sequência é altamente conservada entre humano, camundongo e rato, o que suporta a reatividade cruzada observada.
• Para Western blotting, recomenda-se começar com diluições entre 1:500 e 1:2000 e validar em lisados de linhas celulares ou tecidos conhecidos por expressar PKCα (ex.: cérebro, coração, linhas celulares de câncer).
• Em IHC-P, a recuperação de antígeno pode ser necessária; otimize as condições de fixação e recuperação para o seu tipo de amostra. Inclua controles positivos e negativos apropriados.
• Como um anticorpo policlonal, o desempenho pode variar entre lotes; é aconselhável realizar a titulação de cada novo lote e confirmar a especificidade no sistema de modelo relevante.

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