PolymAb® de Coelho Anti-PKC alpha para WB e ELISA - P17252

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PKC alpha

• A proteína quinase C alfa tipo (PKCα) é uma serina/treonina-proteína quinase dependente de cálcio, fosfolipídios e diacilglicerol (DAG), codificada pelo gene PRKCA. Pertence à família da proteína quinase C e contém domínios regulatórios de dedo de zinco e um domínio catalítico de quinase.
• Na biologia do câncer, PKCα é altamente expressa em gliomas e câncer de mama, onde atua como promotor tumoral e contribui para fenótipos malignos ao regular a proliferação celular, apoptose e migração através de vias como a MAPK/ERK.
• PKCα desempenha papéis cardiovasculares críticos: modula negativamente a contratilidade miocárdica ao fosforilar a troponina T cardíaca (TNNT2), promove a hipertrofia cardíaca através da sinalização ERK1/2 e é necessária para a hipertrofia de cardiomiócitos após estimulação com PMA.
• Na angiogênese e na função plaquetária, PKCα medeia a proliferação de células endoteliais induzida por VEGFA e a formação de tubos, além de ativar a integrina plaquetária αIIbβ3 através da via RAP1GAP, facilitando a agregação plaquetária induzida por cálcio e a formação de trombos.
• PKCα fosforila substratos chave a jusante: fosforila o fator de troca guanina DOCK8 de CDC42 para aumentar a atividade de CDC42 durante a migração de células T, fosforila KLHL3 para diminuir sua interação com WNK4 em resposta à angiotensina II, e ativa LRRK1 envolvida no transporte intracelular mediado por RAB. Referências relacionadas: PMID:28028151 PMID:25313067 PMID:36040231
• Subcelularmente, PKCα se localiza dinamicamente no citoplasma, membrana celular, membrana mitocondrial e núcleo, translocando entre os compartimentos em resposta a estímulos. As modificações pós-traducionais incluem fosforilação e acetilação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blotting, considere usar controles positivos como lisados celulares de HeLa, MCF-7 ou A431, que expressam PKCα endógena. Uma faixa de diluição inicial deve ser determinada empiricamente.
• Como o imunógeno é a proteína PKCα humana recombinante e a reatividade cruzada com camundongo e rato é reportada, valide o anticorpo no sistema de amostra relevante para confirmar a detecção espécie-específica.
• Para aplicações em ELISA, avalie o pareamento com um anticorpo de captura apropriado e otimize as condições do ensaio; a proteína PKCα recombinante pode servir como padrão.
• Mudanças conformacionais dependentes de fosforilação podem influenciar a ligação do anticorpo; se estiver estudando PKCα ativada, considere o pré-tratamento com forbol ésteres (ex: PMA) ou outros estímulos em ensaios celulares.

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