Anticorpo monoclonal de coelho Anti-PKC delta para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q05655

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PKC delta

• A PKC delta, codificada pelo gene PRKCD, é um membro da família das proteínas quinase C e funciona como uma serina/treonina quinase independente de cálcio e ativada por diacilglicerol.
• Ela desempenha papéis duplos na apoptose: pró-apoptótica após dano ao DNA ao ativar p53/TP53 via BCLAF1 ou CHUK/IKKA, e anti-apoptótica durante a morte celular iniciada por receptor de citocinas; também media a sobrevivência induzida por TRAIL em células de glioma (PubMed:21406692, PubMed:21810427, PubMed:15774464). Referências relacionadas: PMID:21406692, PMID:21810427, PMID:15774464
• Está envolvida na regulação do ciclo celular, parando a transição G1/S via CDKN1A/p21 e inibindo o CCNA2, além de fosforilar a CDK1 para o ponto de verificação G2/M após dano por UV; também promove a sobrevivência de células cancerosas ao induzir a ciclina D1 e ativar as vias NF-kappa-B, AKT1 e MAPK.
• Regula a imunidade inata: necessária para a atividade da NADPH oxidase e produção de superóxido em neutrófilos e eosinófilos ao fosforilar NCF1/p47-phox, e media a imunidade antifúngica via fosforilação de CARD9 (PubMed:19801500, PubMed:11748588). Referências relacionadas: PMID:19801500, PMID:11748588
• Modula a função plaquetária: é um regulador negativo da formação de filopódios ao interagir com VASP, e regula diferentemente a secreção de grânulos densos a jusante dos receptores PAR e CD36 (PubMed:16940418, PubMed:19587372). Referências relacionadas: PMID:16940418, PMID:19587372
• Se localiza no citoplasma, núcleo, região perinuclear, membrana celular, mitocôndria e sistema de endomembranas, refletindo seus diversos papéis de sinalização.
• Contém domínios quinase catalíticos e semelhantes a C2 com motivos de dedo de zinco, e é regulada por fosforilação; existem múltiplas isoformas geradas por splicing alternativo.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Desenho do imunógeno: Este anticorpo foi desenvolvido contra uma proteína recombinante correspondente aos aminoácidos 547-653 próximos à extremidade C-terminal da PKC delta humana. Considere verificar a especificidade do epítopo para o seu contexto experimental.
• Western blotting (WB): O peso molecular previsto é de 78 kDa. Use controles de carregamento de proteína adequados e considere inibidores de fosfatase para preservar o estado de fosforilação.
• Imunohistoquímica (IHC-P): A recuperação de antígeno pode ser necessária para tecidos fixados em formalina e embebidos em parafina. Otimize o buffer de recuperação e o sistema de detecção para suas amostras.
• Imunofluorescência (IF/ICC): As condições de permeabilização e fixação devem ser otimizadas. Pode ser observada localização nuclear e citoplasmática.
• ELISA: Adequado para ELISA direto ou de captura; valide com padrões e controles apropriados.
• Reatividade cruzada: Foi relatada reatividade com humana, camundongo e rato. Confirme a reatividade na sua espécie e tecido de interesse.

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