Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-PKC epsilon para WB, IHC-P, ELISA - Q02156

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PKC epsilon

• A proteína quinase C tipo epsilon (PKC epsilon, também conhecida como nPKC-epsilon) é uma proteína quinase de serina/treonina independente de cálcio, dependente de fosfolipídios e diacilglicerol (DAG), codificada pelo gene PRKCE em humanos. Pertence à família da proteína quinase C e contém um domínio tipo éster de forbol/DAG de dedo de zinco.
• O PKC epsilon desempenha papéis fundamentais na regulação da dinâmica do citoesqueleto, incluindo adesão celular, motilidade, migração e progressão do ciclo celular. Media a sinalização dependente de integrina e fosforila substratos como MARCKS e vimentina para controlar a dispersão celular e o transporte direcional.
• Esta quinase está envolvida no crescimento de neurônios, plasticidade sináptica e regulação de canais iônicos, contribuindo para a neuritogênese e facilitação pré-sináptica. Também modula a sinalização da dor através da fosforilação do TRPV1.
• O PKC epsilon participa das respostas imunes fosforilando TICAM2/TRAM a jusante do TLR4, levando à ativação de IRF3 e produção de citocinas. Também contribui para a invasão de células cancerígenas através da fosforilação de STAT3.
• Em células cardíacas, o PKC epsilon regula a função dos miofilamentos e o acoplamento excitação-contração, e sua fosforilação persistente da troponina I está implicada na cardiomiopatia dilatada. Também desempenha um papel na hipertrofia dos cardiomiócitos.
• O PKC epsilon localiza-se no citoplasma, citoesqueleto, membrana celular, região perinuclear e núcleo, permitindo a regulação espacial dinâmica de suas atividades de sinalização.
• Funções adicionais incluem a regulação da apoptose em progenitores eritroides, modulação da ativação de AKT1 induzida por insulina e fosforilação de NLRP5/MATER para modular a via AKT em células do cumulus. Referências relacionadas: PMID:19542546
• O PKC epsilon também fosforila e ativa LRRK1, que por sua vez fosforila proteínas RAB envolvidas no tráfego intracelular. Referências relacionadas: PMID:36040231
• Ao nível proteico, o PKC epsilon é expresso em células do cumulus, com expressão mais ampla provável em vários tecidos com base em estudos funcionais.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde ao domínio catalítico terminal C (aa 488-737), que é altamente conservado entre o PKC epsilon humano, de camundongo e de rato, apoiando a reatividade cruzada relatada.
• Para Western blot (WB), a banda esperada é cerca de 84 kDa. Considere o uso de lisados celulares totais de células estimuladas (por exemplo, tratadas com PMA) para melhorar a detecção.
• Em imuno-histoquímica (IHC-P), podem ser necessárias etapas apropriadas de recuperação de antígeno e permeabilização devido à localização multicompartimental da quinase.
• O desempenho em ELISA pode depender do antígeno de revestimento e do formato de detecção; valide usando proteína recombinante ou padrões de peptídeos.
• Ao estudar a ativação do PKC epsilon, considere avaliar seu estado de fosforilação ou translocação como marcadores de ativação, pois o anticorpo pode reconhecer as formas fosforiladas e não fosforiladas.

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