Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-PKC mu (PRKD1) para WB e ELISA - Q15139

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PKC mu

• Identidade da proteína e apelidos: PKC mu, oficialmente designada como serina/treonina-proteína cinase D1 (PRKD1), também é conhecida como proteína cinase D (PKD), nPKC-mu e PKCM. Pertence à família das proteínas cinase D e contém domínios de dedo de zinco ricos em cisteína, típicos da superfamília PKC.
• Sinalização mediada por DAG e atividade da cinase: A PKC mu converte sinais transitórios de diacilglicerol (DAG) em respostas fisiológicas sustentadas por meio da fosforilação de EGFR, RIN1 e outros substratos, regulando assim as cascatas de sinalização MAPK8/JNK1, Ras e MAPK1/3 (ERK1/2). Essas vias controlam a proliferação, diferenciação e sobrevivência celular. Referências relacionadas: PMID:10764790 PMID:12505989 PMID:12637538 PMID:10523301
• Integridade da membrana do Golgi e tráfego: A PKC mu atua a jusante das proteínas G heterotriméricas para manter a integridade estrutural do Golgi e regula a fissão de vesículas de transporte na rede trans-Golgi (TGN), garantindo o tráfego adequado de proteínas secretoras para a membrana plasmática.
• Sobrevivência celular e regulação da apoptose: Sob estresse oxidativo, a fosforilação no Tyr-463 por SRC-ABL1 promove a sobrevivência celular por meio da ativação IKK/NF-kappa-B. Por outro lado, a clivagem pela caspase-3 no Asp-378 durante estresse genotóxico aumenta sua atividade cinase e sensibiliza as células à apoptose. Referências relacionadas: PMID:12505989 PMID:10764790
• Migração celular e diferenciação de osteoblastos: A PKC mu controla a migração celular regulando a reciclagem de integrinas e a renovação das adesões focais. Em osteoblastos, ela medeia a exportação nuclear de HDAC7 induzida por BMP2, aliviando a repressão de RUNX2 para promover a diferenciação. Referências relacionadas: PMID:18509061
• Hipertrofia cardíaca e angiogênese: Em cardiomiócitos, a PKC mu fosforila HDAC5, desencadeando sua exportação nuclear e a expressão gênica dependente de MEF2 que impulsiona a hipertrofia patológica. Durante a angiogênese induzida por VEGF, ela regulamenta de forma similar a exportação nuclear de HDAC7 para promover a migração de células endoteliais e a formação de tubos. Referências relacionadas: PMID:18332134 PMID:19211839
• Imunidade inata e respostas inflamatórias: A PKC mu se liga diretamente e fosforila o receptor 5 do tipo Toll (TLR5) após a estimulação por flagelina, levando à ativação de MAPK14/p38 e à produção de citocinas inflamatórias. Ela também fosforila NLRP3 para facilitar a montagem do inflamassomo. Referências relacionadas: PMID:17442957

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado compreende os aminoácidos 200–300 da PKC mu humana (Q15139). Essa região é conservada em camundongos e ratos (conforme indicado pela reatividade cruzada), mas a verificação da sequência na sua espécie alvo é recomendada para um desenho de ensaio ideal.
• Para Western blotting, espere uma banda de aproximadamente 102 kDa. Proteínas de alto peso molecular podem exigir tempos de transferência mais longos ou condições de blotting otimizadas; o carregamento de quantidade suficiente de proteína e o uso de amostras frescas podem reduzir artefatos de degradação.
• Em aplicações de ELISA, o desempenho do anticorpo pode ser influenciado pela concentração de revestimento do antígeno e pelo sistema de detecção. Recomenda-se a realização de experimentos de titulação e a inclusão de controles adequados.
• Como anticorpo monoclonal de coelho, ele oferece reprodutibilidade entre lotes e alta afinidade, sendo adequado para ensaios quantitativos quando cuidadosamente validado.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato foi relatada; no entanto, a extensão da reatividade pode variar entre as aplicações. Confirme a especificidade no contexto de tecido ou celular relevante.

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