Anticorpo Policlonal Anti-PKC zeta para WB, IF/ICC, ELISA - Q05513

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PKC zeta

• A PKC zeta (nPKC-zeta) é uma proteína quinase C atípica, que não apresenta sensibilidade ao cálcio e diacilglicerol, e atua como serina/treonina-proteína quinase na ativação de NF-kappa-B, sinalização mitogênica, proliferação celular, polaridade celular, resposta inflamatória e manutenção da potenciação de longa duração (LTP).
• A jusante de PI3K, a PKC zeta ativa a cascata MEK1-ERK2 independentemente de RAF1 em macrófagos e após estímulos mitogênicos. Ela também contribui para a ativação dependente de insulina de AKT3 e a translocação de GLUT4 em adipócitos, agindo parcialmente como adaptador.
• A PKC zeta medeia a ativação de NF-kappa-B por meio de interações com SQSTM1/p62, RIPK1 e TRAF6, levando à fosforilação de IKBKB e degradação do inibidor de NF-kappa-B. Ela ainda fosforila RELA na Ser-311 para neutralizar a repressão mediada por SETD6.
• Na polaridade celular, a PKC zeta forma um complexo citoplasmático com PARD6A e é recrutada por CDC42 para estabelecer a polaridade com motores de microtúbulos. Ela estimula a diferenciação neuronal com FEZ1 e é necessária para a LTP de fase tardia nas sinapses CA1 hipocampais, sendo crucial para a memória de longo prazo.
• A PKC zeta fosforila VAMP2 in vitro e ativa LRRK1, que por sua vez fosforila proteínas RAB envolvidas no tráfego intracelular. Referências relacionadas: PMID:17313651 PMID:36040231
• A PKC zeta se localiza no citoplasma, endossomos, junções celulares e membrana. É expressa predominantemente no cérebro, com níveis mais baixos em pulmão, rim e testículo. Ela contém um domínio de dedo de zinco e sítio de ligação a ATP, e está sujeita a splicing alternativo e fosforilação.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região C-terminal (aminoácidos 476–547), o que pode proporcionar boa acessibilidade ao epítopo para detecção de proteínas nativas e desnaturadas.
• Para Western blotting, o peso molecular previsto é de ~68 kDa; inclua sempre controles positivos e negativos para confirmar a especificidade.
• Em imunofluorescência/ICC, otimize as condições de fixação e permeabilização, pois a PKC zeta pode se localizar em vários compartimentos (citoplasma, membrana, endossomos, junções).
• O ELISA pode ser usado para detecção quantitativa de PKC zeta em lisados celulares ou proteínas purificadas; valide com padrões conhecidos.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato é esperada; confirme a reatividade no seu sistema de amostra específico antes de estudos em larga escala.

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