Anti-PKM1/2 Rabbit PolymAb® Anticorpo Monoclonal para WB, IF/ICC, IF-P, IHC-P, ELISA - P14618

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PKM1/2

• O PKM1/2, codificado pelo gene PKM, é uma piruvato quinase que catalisa a etapa final limitante da velocidade da glicólise, transferindo um grupo fosforil do fosfoenolpiruvato (PEP) para o ADP para gerar ATP. Referências relacionadas: PMID:15996096, PMID:1854723, PMID:20847263
• O gene PKM produz duas principais isoformas através de splicing alternativo: o PKM2 embrionário e associado a tumores, e o PKM1 específico de tecidos adultos, que diferem em sua regulação e atividade. Referências relacionadas: PMID:18337823, PMID:20847263
• A atividade do PKM2 é controlada por uma chave alostérica entre um tetrâmero altamente ativo e um dímero quase inativo; essa mudança dita se a glicose é usada para a produção de ATP ou desviada para vias biossintéticas, um processo crítico para a proliferação e sobrevivência das células tumorais. Referências relacionadas: PMID:15996096, PMID:1854723, PMID:20847263
• Além de seu papel metabólico citoplasmático, o PKM2 transloca para o núcleo, onde atua como uma proteína quinase, fosforilando alvos como STAT3 (Tyr-705) e histona H3 (Thr-11) para modular a transcrição, incluindo a promoção da expressão de VEGFA na angiogênese. Referências relacionadas: PMID:18191611, PMID:21620138, PMID:22056988, PMID:22306293, PMID:22901803, PMID:24120661
• O PKM2 é expresso especificamente em células em proliferação, como células-tronco embrionárias e células cancerígenas, enquanto o PKM1 é encontrado predominantemente em tecidos adultos normais. Referências relacionadas: PMID:18337823
• A proteína se localiza tanto no citoplasma quanto no núcleo, consistente com seus papéis duplos no metabolismo e regulação transcricional.
• A proteína PKM2 sofre extensas modificações pós-traducionais — incluindo acetilação, metilação, fosforilação e hidroxilação — que regulam sua atividade enzimática, localização e funções não metabólicas.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para aplicações de Western blot e imuno-histoquímica, use lisados de células ou tecidos de origem humana, de camundongo ou de rato, pois o anticorpo mostra ampla reatividade cruzada.
• Dada a localização dupla citoplasmática e nuclear do PKM1/2, considere protocolos de fracionamento apropriados ou co-coloração em experimentos de IF/ICC para confirmar a distribuição subcelular.
• Ao avaliar funções específicas do PKM2, valide a especificidade da detecção usando linhagens de células deficientes em PKM2 ou knockdown mediado por siRNA, pois o imunógeno abrange uma região conservada entre as isoformas.
• Otimize as diluições do anticorpo para cada aplicação através de uma série de diluições, pois as concentrações de trabalho ideais podem variar entre os tipos de amostras e sistemas de detecção.

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