Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-PKM2 para WB, IF/ICC, ELISA - P14618

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PKM2

• A PKM2 catalisa a etapa final limitante da taxa da glicólise, convertendo fosfoenolpiruvato em piruvato e gerando ATP. Sua atividade é alostericamente regulada, e o equilíbrio entre o tetrâmero ativo e o dímero menos ativo controla o fluxo metabólico. Referências relacionadas: PMID:15996096, PMID:1854723, PMID:20847263
• A enzima glicolítica também atua como uma quinase de proteína no núcleo, fosforilando STAT3 na Tyr-705 e a histona H3 na Thr-11 para regular a transcrição. Referências relacionadas: PMID:18191611, PMID:21620138, PMID:22056988, PMID:22306293, PMID:22901803, PMID:24120661
• A PKM2 nuclear promove a transcrição de VEGFA juntamente com subunidades de NF-kB, aumentando a angiogênese, e impulsiona a expressão de CD274 em contextos imunológicos específicos. Referências relacionadas: PMID:33314660
• A PKM2 desempenha um papel crítico na proliferação e sobrevivência de células tumorais; sua expressão é regulada positivamente em muitos cânceres, tornando-a um centro metabólico e regulatório chave na tumorigênese. Referências relacionadas: PMID:18337823, PMID:22901803, PMID:26787900
• A proteína é predominantemente citoplasmática, mas transloca para o núcleo após sinalização (ex.: ativação do EGFR) para exercer suas funções não metabólicas.
• A PKM2 é expressa especificamente em células proliferantes, incluindo células-tronco embrionárias e células cancerígenas, e pode ser substituída pela isoforma adulta PKM1 em tecidos diferenciados. Referências relacionadas: PMID:18337823, PMID:20847263
• Modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, fosforilação e hidroxilação, ajustam finamente sua atividade e localização subcelular.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 11-221 da PKM2 (NP_001193728.1), uma região que abrange o domínio N-terminal. Considere testar uma faixa de diluições de anticorpo (ex.: 1:500–1:5000 para WB) e otimizar as condições de bloqueio para obter a melhor relação sinal-ruído.
• Para IF/ICC, fixe e permeabilize as células adequadamente e valide o padrão de coloração em relação à distribuição subcelular conhecida da PKM2 no tipo celular relevante.
• Ao realizar ELISA, inclua controles positivos e negativos adequados para confirmar a reatividade e especificidade do anticorpo.
• Devido à reatividade cruzada com PKM2 de camundongo e rato, o anticorpo pode ser adequado para detectar o alvo em modelos de roedores; no entanto, confirme por alinhamento de sequência e experimentos piloto.

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